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标题:【求助】细胞培养时培养液的渗透压调节问题

xyw5[使用道具]
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【求助】细胞培养时培养液的渗透压调节问题


大家好。我现在的实验即将开始体外培养七鳃鳗的血细胞。我想把我的培养液(L-15)调节到稍高于正常海水(1000mOsmol/kg)的水平.请问应该用什么试剂来调节呢?调节后的培养液的渗透压值,有什么办法准确算出来吗(在不使用冰点渗透压仪的情况下)?
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xyw5[使用道具]
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事实上,这个问题困扰了我好长时间。一般的细胞培养基,渗透压在2、3百毫渗之间。但由于我养的是海生动物的细胞,渗透压要求非常高,如何使用如Nacl,Cacl2等调高渗透压,就成了一个棘手的问题。比如我上传的这篇《日本对虾肝胰腺的细胞培养》.caj,作者使 用NaCl,CaCl2,MgCl2,
NaHCO3等盐调节199培养基渗透压为630,730,830μmol/g,但是各种成分的比例是多少?渗透压值如此精确,是如何计算出来的?还是使用冰点渗透压仪测出来的呢?
太多的问题需要解惑,请大家多多指点。谢谢!
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831226[使用道具]
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按照1molNacl=58.5g;1molCaCl2=111g; 1molMgCl2=95g 计算培养基的渗透压
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tuuu2[使用道具]
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按照1molNacl=58.5g;1molCaCl2=111g; 1molMgCl2=95g 计算培养基的渗透压

======================

能再说得详细点吗?
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tuuu2[使用道具]
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或者,对一个以前从没有人做过的动物的细胞培养,如果谁能告诉我根据什么设计它的专用细胞培养基或使用已存在的细胞培养基,我也会非常感谢他。谢谢!
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tuuu2[使用道具]
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今天让我从互联网上找到了答案:

物质在溶液中的渗透压功能决定于它的粒子数,与粒子的质量、荷电量无关,
所以物质的mOsm 数和mmol 数是一样的。
溶液的渗透压大小决定于单位体积溶液中所含溶质的mOsm 数,即溶液的渗
透浓度。正常人体液的渗透浓度在280~310mOsm/L之间。
血浆渗透浓度(mOsm/L)=[血浆Na+(mmol/L)+10]×2
(加10 是代表Na+以外的阳离子含量,乘2 是因为阴阳离子以等量看待)
5%葡萄糖液渗透浓度=5×1000×10/180=278 mOsm/L
0.9%NaCl 液渗透浓度=0.9×1000×10/58.5×2=308 mOsm/L

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is2011[使用道具]
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谢谢,我也在养海水鱼细胞,正好用着
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