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标题:【求助】发新话题 回复话题 【求助】

fsdd817[使用道具]
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发表于 2013-1-5 16:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】发新话题 回复话题 【求助】

如题，因为我师兄之前冻存的SW480细胞冻存液比例是DMEM：FBS：DMSO=7:2:1，我复苏九瓶只活了一瓶，最后还不小心污染了（呵呵真不好意思），但是HCT116细胞全部复苏活了（也是配的这个比例的冻存液）。
我在网上看到别人说SW480和Lovo细胞冻存液比例应该为培养基：DMSO=95%：5%，不知道他的培养基是指完全的还是什么，也不知这个方法是否可行，求指教~~~
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gogo[使用道具]
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发表于 2013-1-5 16:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
相关疾病：
肿瘤
细胞英文名称 SW480 [SW 480；SW-480] 细胞中文名 人结直肠腺癌细胞
形态特性 上皮样 生长特性 贴壁生长　
特征特性 SW480源自一位51岁白人男性患者的原位直肠腺癌，而SW620源自同一病人一年后的淋巴结转移灶。 该细胞CSAp和直肠抗原3阴性；角蛋白阳性；p53基因第273位密码子的G →A突变引起Arg→His替代，309位密码子的C→T突变导致Pro→Ser替代；细胞p53蛋白表达水平升高；癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis 和fos的表达呈阳性；未检测到癌基因N-myc的表达；不表达Matrilysin（一种与肿瘤侵袭相关的金属蛋白酶）。有报道称该细胞表达GM-CSF。ras
培养基 IMDM: Iscove＇s Modiefied Dulbecco＇s Medium
血清 10%FBS　 其它因子 无
传代方法 1:2~1:8传代；1~2天换液1次。 传代情况 C4
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS　

细胞英文名称 LoVo 细胞中文名 人结直肠腺癌细胞
形态特性 上皮样 生长特性 贴壁生长　
特征特性 该细胞是1971年从诊断为结肠腺癌的56岁白人男性的一个左锁骨上区的转移灶建系的。 癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、Myb和fos的表达呈阳性；未检测到sis和N-myc的表达。它在裸鼠中能成瘤；表达肿瘤特异的核基质蛋白蛋白CC-3和CC-4。
培养基 F12K
血清 10%FBS　 其它因子 无
传代方法 1:3~1:10传代；2~3天换液1次。 传代情况 C3
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS　
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caihong[使用道具]
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发表于 2013-1-5 16:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 gogo 于 2013-1-5 16:56 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
相关疾病：
肿瘤
细胞英文名称 SW480 [SW 480；SW-480] 细胞中文名 人结直肠腺癌细胞
形态特性 上皮样 生长特性 贴壁生长　
特征特性 SW480源自一位51岁白人男性患者的原位直肠腺癌，而SW620源自同一病人一年后的淋巴结 ...

相关疾病：肿瘤
我就说冻存液配制有问题， 大侠， 无限感谢啊呵呵~~
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发表于 2013-1-5 16:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
老师 想问一下 CACO-2 冻存条件 感谢啊呵呵~~
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xingyi08[使用道具]
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发表于 2013-1-5 16:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
相关疾病：
结肠癌
老师就免了,查细胞和培养基信息可以找我.
细胞英文名称 Caco-2 细胞中文名 人结直肠腺癌细胞
形态特性 上皮样　 生长特性 贴壁生长　
特征特性 此细胞株分离自一个原发性结肠癌。当细胞长满时，表现出典型的肠细胞分化的特征。Caco-2细胞表达维生素A酸结合蛋白I和视黄醇结合蛋白II，角蛋白阳性。
培养基 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle＇s Balanced Salts)
血清 20%FBS　 其它因子 1%NEAA+10mM Hepes　
传代方法 1:4~1:6传代，细胞达80%汇合时进行传代；每周1~2次换液。 传代情况 P27
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS　 支原体检测 阴性　
同工酶 　 染色体 85~90，91~100
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发表于 2013-1-5 16:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你好，请问Caco-2用DMEM+10%FBS养行吗？别的成分都加。是不是一定要20%的FBS？我养的长得很慢。
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发表于 2013-1-5 16:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我也在养，我说下哈，我原来是用20%养的，现在用10%养也挺好，反正两种用起来都长得慢，养久了 长得就好点了~~还有，我原来是这样的，细胞长得慢飘的多我就换液换的勤，后来发现这样更不好，现在换的不怎么勤，长得还好一点！
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发表于 2013-1-5 17:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我现在也在养Caco2这种细胞，早在买细胞之前就听说很难养，我们是7.7号细胞才到，当晚就传代了，发现细胞贴壁有点慢，两天才换的液，培养基是DMEM+15%胎牛血清，细胞长得很慢。想请教各位高手这种细胞应该怎么养啊，多谢赐教！
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发表于 2013-1-5 17:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

长的快就不是Caco-2了
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fei1226com[使用道具]
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发表于 2013-1-5 17:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我现在也在养Caco2这种细胞，早在买细胞之前就听说很难养，我们是7.7号细胞才到，当晚就传代了，发现细胞贴壁有点慢，两天才换的液，培养基是DMEM+15%胎牛血清，细胞长得很慢。想请教各位高手这种细胞应该怎么养啊，多谢赐教！

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这种细胞嘛，虽然我没用过它，但是养了很久，知道一点它的性格，开始的时候长得比较慢（就是相对于正常时更慢），而且聚在一起很烦，后来我分瓶的时候不再离心了，胰酶快消化的时候倒掉大量，用含血清培养基吹打致细胞团多次（我觉得可以猛吹打），分瓶装就行了，最后一点就是一个礼拜换两次液左右就行了，勤换液好像也没啥用！10%就够了！
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