小中大各位前辈：我最近在进行外周血T淋巴细胞的培养，先用淋巴细胞分离液分离PBMC,再用美天旎免疫磁珠分离出T淋巴细胞，之后进行培养，但不知道培养时要不要加PHA及IL-2，查资料后也是众说纷纭，所以没加，培养二十多天后，细胞每况愈下，不见增殖，还有大量细胞碎片产生，特向各位请教，需要加入PHA和IL-2吗？加的话浓度是多少？应该什么时候加入？因我的课题是观察某种药物对T淋巴细胞分泌的影响，加入会不会影响细胞分泌细胞因子？
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【加入PHA】T淋巴细胞在体外经过植物血凝素的刺激后，可以转化为淋巴母细胞。
【加IL-2】这种因子能促进和维持T细胞长期培养, 称为T细胞生长因子 (T cell growth factor, TCGF),1979年统一命名为白细胞介素2(interleukin 2,IL-2)。
所以加不加要看你评价的是啥药物，以及药物作用机理、代谢......。
