小中大
你好,大鼠血管平滑肌细胞我们公司技术部做过,我只知道一些简单的操作,具体的流程还得请教我们技术人员,下面是我个人的一点小建议,希望能够帮得上忙哦!
1 剪的组织块要小一点,尽量要有多角形,以便细胞爬出来;
2 操作过程中要避免过分牵拉血管;
3 所用的大鼠不要太大,150g左右
4 把组织块贴入瓶子中时,可以沾点百分之二十的胎牛血清,那样更容易铺平
培养用的组织(如胸主动脉)从体内取出来后,直接置入DMEM的血清瓶中(注意:瓶中的DMEM的量能漫过组织就可),在血清瓶中中经过一般的清洗,把血管外表的血丝洗一洗就可,然后 取出来含有D-Hanks液的平皿中,去除血管外表纤维组织,刮除内膜,稍微将平滑肌组织带有的水份用眼科镊刮除后,移入青霉素瓶中,滴入1-2滴的胎牛血清,然后用剪刀剪,一般剪100下,大概就是我们需要的组织大小了。铺瓶,加培养基,至于多少时间转正瓶子,主要还是看你铺瓶时候组织的湿度了。
我们齐氏生物是专门自己培养原代细胞的公司,现在到5月底我们正在清库存,这个是丁香通上面发布信息的网址,cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/topic/22895964') 如果有需要,或者要咨询问题的话,欢迎哦!