【求助】transwell细胞迁移实验

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标题:【求助】transwell细胞迁移实验

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发表于 2013-1-8 13:13 资料个人空间短消息加为好友

小中大

用transwell做了细胞迁移实验，不知道拍下的照片对不对，请教各位分析一下，多谢。

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2013-1-8 13:13

20724030.snap.jpg (74.8 KB)

04906[使用道具]
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发表于 2013-1-8 13:13 资料个人空间短消息加为好友

小中大

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2013-1-8 13:13

69236754.snap.jpg (81.68 KB)

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发表于 2013-1-8 13:13 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我做过这个实验，感觉你调焦没调好，很亮的小圆形是聚碳酸酯膜上的孔隙不是细胞，你把孔拍的太清晰而细胞很模糊，我初拍时也遇到过这种情况，调整一下显微镜焦距，尽量使细胞变清楚，这时候孔是不太明显的，可以拍出很漂亮的图片。

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2013-1-8 13:13

13947869.snap.jpg (29.37 KB)

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发表于 2013-1-8 13:14 资料个人空间短消息加为好友

小中大

如果你把小室内的基质胶用棉签已经擦干净，那么拍的照片是对的，但是我感觉穿过去的细胞太多，不易计数，穿膜时间可以缩短一下

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发表于 2013-1-8 13:14 资料个人空间短消息加为好友

小中大

谢谢各位，下次再调一下焦距把细胞拍清楚一点，我做的细胞迁移实验没有铺胶，培养24小时后染色拍照的，接种的细胞数有10000个每孔。另外再请教，如果观察某种液体对细胞迁移的影响，上室内是用2%血清浓度的培养基制备的细胞悬液，下室是2%血清浓度培养基+某种液体，这样设计对吗？我看文献有的是把刺激因素加在上室，也有是加在下室，有点不明白，请各位讲解一下，谢谢！

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发表于 2013-1-8 13:15 资料个人空间短消息加为好友

小中大

拍的是细胞了，但是你focus到了小孔而不是细胞上，我们因为这个问题被老板骂了好几次。就是焦距没调好，一定要对着细胞，不要管小孔是否清晰，最终的结果是看到细胞清晰就行了。
另外，如果你做的是促进细胞迁移的话（类似生长因子），那就只加在下面，如果是看抑制的话，那上下最好保持相同的浓度。