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标题:【求助】细胞内布满大量芝麻样颗粒，细胞像被这些颗粒...

am10[使用道具]
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发表于 2013-1-8 13:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】细胞内布满大量芝麻样颗粒，细胞像被这些颗粒...

细胞内布满大量芝麻样颗粒，细胞像被这些颗粒肢解一样，最后只剩下空壳，留着颗粒继续贴着瓶壁！细胞间隙也有大量棒状黑点贴着瓶壁，飘落的死细胞周围也是黑点围绕，并附有丝状物，丝状物上还串着黑色颗粒！
现在细胞状态极差，不长，培养液从来没有混过，就是很容易变黄，我孵箱里所有细胞全这种状态，新复苏的才两天，也是如此，我想如果是真菌那么我能看到团状菌苔，培养液也变黄，如果是支原体，我今天用了阿奇霉素，感觉量很大了，细胞还是那样！
细胞不疯，我快疯了，鸡肋食之无味弃之可惜！
大侠救我。
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101010[使用道具]
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发表于 2013-1-8 13:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 am10 于 2013-1-8 13:16 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
细胞内布满大量芝麻样颗粒，细胞像被这些颗粒肢解一样，最后只剩下空壳，留着颗粒继续贴着瓶壁！细胞间隙也有大量棒状黑点贴着瓶壁，飘落的死细胞周围也是黑点围绕，并附有丝状物，丝状物上还串着黑色颗粒！
现在细胞状态极差，不长，培 ...

换血清.
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发表于 2013-1-8 13:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

传说中的细胞沙化？换血清或者加大血清浓度
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kuohao17[使用道具]
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发表于 2013-1-8 13:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

是不是黑色点状的，在胞质中？
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发表于 2013-1-8 13:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

有可能是衣原体或是支原体污染，建议1。培养基和血清不要再水浴箱预热2。更换所有培养用品或重新灭菌3。每次换液时用PBS多洗几遍，培养基加用青链霉素和两性霉素4。血清使用之前灭火。
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发表于 2013-1-8 13:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我的细胞也出现同样的情况。。。
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发表于 2013-1-8 13:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
黑胶虫
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发表于 2013-1-8 13:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

如果细胞比较珍贵的话，建议用培养基或PBS多次清洗细胞，（多次！），之后加有抗生素的培养基，看是否有好转， 但也有可能是细胞状态不好自己吐出的大颗粒。
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一叶[使用道具]
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发表于 2013-1-8 13:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我们原来也出现过这种情况 后来分析觉得可能是两种情况：1.细胞株老化所致，细胞经过多次传代，虽然是新复苏的，但是状态已经不是很好了。建议使用比较新的细胞株试一下。2.现在我们所使用的来观察细胞的显微镜比原来的清晰度高很多，这就导致我们再观察细胞的时候，能够同时看到细胞里面的细胞器，这些细胞器在相差显微镜下经过折射就会看到很多黑点，至于你说的在旁边也能看到，其实是细胞死亡破裂后的溢出的细胞器。这些细胞可以继续使用的。
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发表于 2013-1-8 13:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

lz最好上个图，不然只描述的话，每个人心里所想的恐怕有很大差别。

培养液变色证明代谢物质增多，PH改变。如果细胞少而变色很快，说明应该是真菌微生物污染（支原体污染只是在细胞繁殖的时候随之扩增，细胞不多的时候，培养液不会有颜色变化）。另外支原体污染不用试剂盒一般也看不出来，对细胞生长的影响不是很大。
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