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标题:【求助】流式检测细胞凋亡

XYZQ[使用道具]
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发表于 2013-1-8 13:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】流式检测细胞凋亡


求助高手：
请问流式细胞图如何看，怎样从图中知道 细胞凋亡的情况
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finger[使用道具]
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发表于 2013-1-8 13:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这要视不同的方法做流式细胞图而定。
如用PI单染已固定的细胞(即细胞周期分析)，则在G0/G1峰前的Sub-G0峰即为细胞凋亡峰；而对于Annex V-FITC/PI双染，则由FITC染色的两个象限的细胞都可作为凋亡细胞，一般认为右下为早期凋亡，右上为中晚期凋亡。
有具体问题再问吧。
GOOD LUCK!
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bamboo16[使用道具]
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发表于 2013-1-8 13:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
好多死细胞也在右上象限的，左上的evens为细胞碎片。
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lxh031[使用道具]
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 小中大
经典地讲，右上象限是晚期凋亡细胞，而左上象限为死亡细胞及其碎片。
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INK[使用道具]
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发表于 2013-1-8 13:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
同意楼上说法, 前提是ANNEXIN V为X轴, 另外, 可以通过FSC/SSC的Gating将碎片去除.
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XYZQ[使用道具]
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发表于 2013-1-8 13:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我做的经过药物处理后的细胞怎么基本上都处于晚期凋亡啊，为什么早期调亡细胞很少啊？
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owanaka[使用道具]
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发表于 2013-1-8 13:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

1、注意药物浓度浓度及作用时间
2、注意后处理对细胞的损伤，特别是对细胞膜完整性的破坏，导致PI进入细胞，呈现晚期凋亡现象。
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49888[使用道具]
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发表于 2013-1-8 13:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

ANNEXIN V为X轴, PI为Y轴，右下为早期凋亡，右上为中晚期凋亡，左上为死亡的细胞
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plaa[使用道具]
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发表于 2013-1-8 13:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
1、注意药物浓度浓度及作用时间
2、注意后处理对细胞的损伤，特别是对细胞膜完整性的破坏，导致PI进入细胞，呈现晚期凋亡现象。
请问你的第2条后处理究竟应该怎么样避免？你应该指的是收集细胞时吧？我很想请教这个过程，作好几次流失了。就是凋亡率太低，请指教。谢谢
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49888[使用道具]
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发表于 2013-1-8 13:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

避免对细胞的损伤主要要注意离心力不要过大，洗涤液、缓冲液等要等渗，pH合适，吹打时不要太激烈，等。
如果你一直凋亡率太低的话，选 一个阳性药物参照一下，以判断是操作上的问题还是药物本身的问题。
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