小中大【求助】BT474人乳腺癌细胞的培养？
最近从别处借到BT474细胞（很不易，是美国人，有问题想问他，就回一句话：请参考文献和atcc网站），但是复苏已经5天了，细胞长得不好。
1. 我用RPMI 1640培养基，没有用ATCC建议的所谓Hybri-Care Medium。我的RPMI 1640一直在用，品质没有问题。网上搜索，RPMI 1640和DMEM都有人在用。
2. 复苏的时候发现2 ml的冻存管里只有1 ml细胞，相信已经用掉了一半。我一直考虑冻融是否破坏了细胞。
3. 复苏时我把1 ml细胞分到了3个盘子。1月31日复苏，到今天2月5日，已经五天。复苏第二天换液时，大部分细胞漂浮，只有很少细胞贴壁。现在，盘子1已经基本死光，盘子2还在挣扎，盘子3我在第三天时换成DMEM培养基，目前情况和盘子2相似。
4. 目前细胞贴壁的，没有发现分裂的迹象，细胞比5天前变大，透明。
4. 网上搜索，有个网页说，The cells are very difficult to culture, grow slowly and after trypsinization are difficult to disaggregate; after thawing the cells look very suffering and need about two weeks to recover。（网址cuturl('http://www.biotech.ist.unige.it/cldb/cl4997.html')）因此我还不敢断言细胞已经没有希望了。难道还没醒过来？
请问各位战友，您是否养过BT474？用的什么培养基？生长快吗？是否像那个英文网页所说的那么难养？
老板看了我的细胞，认为已经没希望了，让我从atcc上面重新订购，因为价格昂贵，我想在订购之前弄清楚。
