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标题:【求助】PMA诱导THP-1细胞分化时用的培养基要加血清吗？

mysmdbl[使用道具]
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发表于 2013-1-8 16:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】PMA诱导THP-1细胞分化时用的培养基要加血清吗？

请教各位战友：PMA诱导THP-1细胞分化时是用无血清培养基还是含血清的呢？
我初步的试验培养基是含10%血清的，加PMA后细胞到是很快贴壁了，但是形态还是圆圆的，没有伪足伸出来，这样是巨噬细胞吗？

若应加不含血清的培养基，原因是什么呢？没有血清了细胞会死吗？
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发表于 2013-1-8 16:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
加血请，我们实验室用100ng/ml pma诱导3d
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发表于 2013-1-8 16:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
那3d后细胞形态有变化吗？我的浓度跟你一样，但是根本没有伪足伸出来啊 细胞还是圆圆的
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eric930[使用道具]
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发表于 2013-1-8 16:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我原来也作过PMA诱导TH“P-1，不知道你诱导分化后 准备拿来干什么

我原来是直接把PMA调整到合适的浓度混到培养液里，然后把细胞悬浮液直接加到96孔板上，大概几小时后贴壁，一天后就可以拿来做巨噬细胞吞噬了。这中间，一般不用换液。 从头到尾，我都没见过THP-1 细胞分出伪足。

PMA本身水解的很厉害，基本上你加到培养液里到第二天就不剩下什么了。
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发表于 2013-1-8 16:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不过，我记得THP-1细胞表面CD标记物，有点怪异，比如，我们用的THP-1细胞，没有CD14....囧...
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发表于 2013-1-8 16:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我原来也作过PMA诱导TH“P-1，不知道你诱导分化后 准备拿来干什么

我原来是直接把PMA调整到合适的浓度混到培养液里，然后把细胞悬浮液直接加到96孔板上，大概几小时后贴壁，一天后就可以拿来做巨噬细胞吞噬了。这中间，一般不用换液。 从头到尾，我都没见过THP-1 细胞分出伪足。

PMA本身水解的很厉害，基本上你加到培养液里到第二天就不剩下什么了。

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我的试验是把THP-1诱导成巨噬细胞后 加LPS刺激活化 再加上一种我们的神药来抑制巨噬细胞的炎症反应，来证明我们的神药有抗炎的作用

我看文献上大家都写加PMA后细胞会成“阿米巴”样 但是我的还是圆球 很迷惑啊
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发表于 2013-1-8 16:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

THP-1 只要经诱导贴壁后 就已经是巨噬细胞了吗？
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发表于 2013-1-8 16:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


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原帖由 mysmdbl 于 2013-1-8 16:48 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

THP-1 只要经诱导贴壁后 就已经是巨噬细胞了吗？

按照我以前的经验，THP-1 大概2小时左右贴壁，但需要等24小时后才能拿来做吞噬试验。所以，我建议诱导分化一天后再做。
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ritou1985[使用道具]
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发表于 2013-1-8 16:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请教各位战友：PMA诱导THP-1细胞分化时是用无血清培养基还是含血清的呢？
我初步的试验培养基是含10%血清的，加PMA后细胞到是很快贴壁了，但是形态还是圆圆的，没有伪足伸出来，这样是巨噬细胞吗？

若应加不含血清的培养基，原因是什么呢？没有血清了细胞会死吗？

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问一下，你用的PMA是在SIGMA买的吗？你的课题是做AS相关的吗？
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mysmdbl[使用道具]
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发表于 2013-1-8 16:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


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原帖由 ritou1985 于 2013-1-8 16:55 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
请教各位战友：PMA诱导THP-1细胞分化时是用无血清培养基还是含血清的呢？
我初步的试验培养基是含10%血清的，加PMA后细胞到是很快贴壁了，但是形态还是圆圆的，没有伪足伸出来，这样是巨噬细胞吗？

若应加不含血清的培养基，原因是 ...

是SIGMA的 但不是AS
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