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标题:【求助】细胞计数与MTT在测定细胞增殖方面有什么区别

ukonptp[使用道具]
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发表于 2013-1-13 16:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】细胞计数与MTT在测定细胞增殖方面有什么区别


对接受干预的细胞进行培养，培养一段时间之后

方法1 ：细胞计数，并计算细胞浓度，细胞增殖抑制率＝（空白组细胞浓度－干预组细胞浓度）÷空白组细胞浓度×100％

方法2 ：96孔板培养接受干预的细胞，做MTT实验，细胞增殖抑制率＝（空白组OD值－干预组OD值）÷空白组OD值×100％

由这两种方法得出的 “细胞增殖抑制率” 是否意义相同

原理上： 细胞计数法只能反映绝对细胞数的多少，而从MTT法的原理中知道，它反映的是细胞的增殖力，只有增殖期的细胞才能被着色，所以是否两者的结果在意义和数值上都有所不同

请教，谢谢
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发表于 2013-1-13 16:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
细胞计数法应该是反映增殖比较好的指标啊，理论上来讲是最好的。但是主观性太强，自然说服力就差一点了。
ＭＴＴ好东西啊，但是只在大规模的药物筛选时候比较常用，说服力强。省钱，精确性不够啊，不是高手的话，常常存在重复性差的问题。是个间接反映细胞增殖的指标，想靠这个发ＳＣＩ，有点悬啊！
直接反映细胞增殖的是ＢＲＤＵ和什么Ｔ3掺入法，后者有点放射性，但是对健康影响比较小的，前者价钱贵啊。
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发表于 2013-1-13 16:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

谁帮我看看这个帖子啊？
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ukonptp[使用道具]
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发表于 2013-1-13 16:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我查过相关的资料大家说法不一，还有没有高手知道的多一些的？
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发表于 2013-1-13 16:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我做了好多MTT，结果发现不理想，原因我认为是和该实验手段有关，虽然加入了MTT,但是死细胞的酶动力学并没有完全消失，检测的结果也细胞计数有较大的差距。要做 MTT的同学要慎重。另外，我认为MTT仅在看趋势方面可以，在精确检测抑制率方面还是不可靠。本人看法，供参考。
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发表于 2013-1-13 16:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
的意思是，在MTT实验中，死细胞也会被着色？
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zzzz[使用道具]
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发表于 2013-1-13 16:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
死细胞也会着色？不会。
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发表于 2013-1-13 16:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
原理上： 细胞计数法只能反映绝对细胞数的多少，而从MTT法的原理中知道，它反映的是细胞的增殖力，只有增殖期的细胞才能被着色，所以是否两者的结果在意义和数值上都有所不同

============================================================================================================

MTT的原理是根据细胞内的线粒体酶与MTT反应会生成 formazan，假设同种细胞的线粒体酶是相等的，每个细胞反应生成的formazan相等，在一定的细胞数量范围内，细胞数与产生的颜色呈正比。
所以如果正确使用MTT法测得的OD值，就相当于细胞数量的相对数。也就是MTT等同于细胞计数。
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popo520[使用道具]
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发表于 2013-1-13 16:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
本人觉得mtt法的说服力更强一些
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发表于 2013-1-13 16:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
1.意义相同
2.MTT是个比较好的反映细胞数的试验，但其有很大的缺陷，需要控制试验条件才能使其符合事实，接种的细胞数和培养时间是很重要的两个因素。
3.显微镜下可见的明显的差别，如果不是足够大，MTT就不能检测出差别。
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