改良CTAB-LiCl法提取枣总RNA体系的建立

国农学通报 宋蓓 比较不同沉淀方法
CTAB较其它几种试剂更能有效去除多糖和酚类等物质。β-巯基乙醇和PVP去除酚类, KAc及无水乙醇去除多糖。
RNA的沉淀方法很多,如LiC1、异丙醇、NaAc和无水乙醇等。本试验对不同的方法进行了比较,其中LiC1沉淀需要在4℃放置过夜,时间长,但是RNA的产率比后两种方法高很多,且RNA纯度好,没有DNA污染,不需要进行去除DNA的纯化操作,减少了RNA降解的几率;LiC1本身沉淀大片段RNA效果好的特点使得到的RNA大片段损失很少,更适于进行后续的分子生物学试验;而异丙醇沉淀获得的沉淀体积大,导致了多糖和酚类物质的共沉淀作用;1/10体积3 mol/L的NaAc和2.5倍体积的无水乙醇所得的RNA产率较低,且和异丙醇沉淀方法一样存在基因组DNA的污染,后续的纯化操作提高了RNA提取的成本且增加了降解的机会。