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标题:[未解决]质谱鉴定—蛋白样品加基质后不干的问题

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
sxjht-123[使用道具]
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质谱鉴定—蛋白样品加基质后不干的问题

大家好!求教大家一个问题:最近我们做酶解后,冻干的样品用样品溶解液溶解,然后加基质,用于质谱鉴定,可是加基质后样品在点样板上不干,求教原因,我们是用4800 MALDI-TOF/TOF Analyzer,蛋白样品石用银染酶解。
谢谢!
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  • miracle   2009-9-4 23:18  可用分  +1   已有热心网友回复 请您及时回应 ...
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j-1982[使用道具]
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回复 #1 sxjht-123 的帖子

看是不是样品溶解液含水太多,芯片如果是争相表面的话水太多是不好干,用吹风机吹一下看。
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  • miracle   2009-9-4 23:19  专家分  +3   感谢您对论坛的支持!欢迎参与技术交流 ...
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aa_tang[使用道具]
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MALDI-TOF,样品制备确实是个问题。。。

[ 本帖最后由 aa_tang 于 2009-9-5 11:58 编辑 ]
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怎么会不干呢 是不是点样太多了啊
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jioe5[使用道具]
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是不是有其它物质啊,看起来像水,但是蒸汽压很低
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  • miracle   2009-9-6 22:18  专家分  +2   欢迎您参与技术交流!
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aa_tang[使用道具]
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回复 #1 sxjht-123 的帖子

楼主的问题解决了没?

今天又想了一下,个人考虑,能否从这两个方面着手:
1. matrix solution; 2. sample solution

加基质,不知道楼主加的是基质溶液还是固态物质?样品溶液和基质溶液所采用的溶剂是否兼容,能否混匀?可以考虑调整buffer的pH值和溶剂种类,看是否更易于挥发?

另外,在排除基质干扰的情况下,能否考虑改用其他基质,看是否可行?

呵呵,简单分析下,希望对楼主有所帮助。
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  • miracle   2009-9-7 19:35  专家分  +3   十分感谢您的热心帮助!
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LAMB[使用道具]
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很有可能是你的溶解液有问题,建议用50%的乙腈+0.1%的TFA溶解基质至饱和后,然后直接用去溶解样品
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  • miracle   2009-9-7 23:04  专家分  +3   感谢您的热心应助!祝您心情愉快! ...
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楼主用的什么基质,CHCA吗?是不是样品里杂七杂八的盐太多了,以致形不成良好的晶体,看起来像亮亮的,感觉不干。
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ghhan[使用道具]
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MALDI的基质是什么?CHCA,DHB还是其他的?样品点不干是不是油状的?如果样品点不干,应该是有杂质在样品中,建议用ziptip去除杂质后再点靶分析。个人建议,仅供参考。
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  • miracle   2009-9-8 17:51  专家分  +2   欢迎参与技术交流!
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liuwei[使用道具]
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我见我们实验室的,在点靶后一般是用白炽灯照着,这样干的快;个人认为肯定会干的,只是时间快慢问题。
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