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标题:[未解决]膜蛋白在293T细胞中不表达

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
072023087[使用道具]
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发表于 2009-9-8 17:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

膜蛋白在293T细胞中不表达

大家好！求教大家一个问题：我做得一个膜蛋白在293T细胞中表达，膜蛋白的基因是人的并且装在PCMV-HA，pCDNA3.1上但是只有一次表达了，其余几次都不表达，为什么？我用的转染试剂是国产生博的，质粒提取试剂盒是Tiagen的。质粒都测过序应该没什么问题。您能帮我找到对膜蛋白表达比较了解的人吗？谢谢！
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  • miracle   2009-9-12 09:04  可用分  +1   已有热心网友回复 请您及时回应 ...
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aa_tang[使用道具]
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发表于 2009-9-9 19:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
对膜蛋白表达不了解，呵呵，友情顶帖
个人认为，实验重现性不好，是不是试剂有问题呢？几次试验试剂都是同一批次的吗？

另外，看看这个帖子是否会有启发？
中国生命科学论坛 » 病毒学 » 请教一个关于转染293T细胞的问题
cuturl('http://bbs.bioon.com/bbs/archiver/tid-251729.html%204K%202007-11-16')
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  • miracle   2009-9-9 22:25  专家分  +3   感谢您对论坛的支持！
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yxiaolan[使用道具]
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发表于 2009-9-10 09:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
跟细胞的状态和质粒抽提的质量很有关系，情况比较复杂！
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  • miracle   2009-9-12 09:05  专家分  +2   谢谢您的热心应助！
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weelai[使用道具]
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发表于 2009-9-10 09:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
没做过膜蛋白，以下两点供参考
1、过一个启动子试一试
2、是不是这个蛋白的密码子和这个表达细胞的优势密码子相差太多
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  • miracle   2009-9-12 09:05  专家分  +3   感谢您提供的建议！
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scnuzorro[使用道具]
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发表于 2009-11-9 18:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
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