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标题:[未解决]做槲皮素,出来的槲皮素的峰是分叉的,不知为何

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ccf335[使用道具]
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做槲皮素,出来的槲皮素的峰是分叉的,不知为何

我在做槲皮素的标准曲线,出来的槲皮素的峰是分叉的,不知为何,用的是waters的柱子,柱子比较老了。我换了其它柱子没出现这种情况。且用这根waters的柱子跑其它的标准品也没出现这种情况。

分叉现象是:峰到顶以后下来大约十分之一高度然后又上去,再下来。

谢谢!!!
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kflsjjfdl[使用道具]
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换的其他柱子规格跟waters的一样么?你用什么做流动相?什么溶解的样品?
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aasle[使用道具]
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可能是柱子污染后,与槲皮素相互作用,引起的峰分叉。或者是超过了柱子负荷,试着减少进样量,看看效果如何。
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  • miracle   2009-9-28 12:00  专家分  +2   欢迎参与技术交流!
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uovt69jn[使用道具]
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旧柱跟其它柱做的结果不一样很明显说明旧柱填料键合相流失严重有关,其次槲皮素在溶剂和流动相中的溶解性差异很大有关。
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  • miracle   2009-9-28 17:37  专家分  +2   欢迎参与技术交流!
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老毒物[使用道具]
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先换一个其他的柱子试一试
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eesa_dc_seein[使用道具]
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楼主 换其他柱子进的是同一个样品吗?换的其他柱子与WATERS的问题柱同一类柱子吗?

这根柱子进其他样品时的柱效如何?
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  • miracle   2009-9-29 11:39  专家分  +2   欢迎参与技术讨论!
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ccf335[使用道具]
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谢谢大家的帮助。我用甲醇溶解的槲皮素,流动相为甲醇:0.4%磷酸。这根旧柱子有没有方法处理一下,让其可以使用来做这个槲皮素的实验。

这根出问题的柱子是一根较旧的柱子,和他作对比的是一根短的国产柱子。刚开始担心是槲皮素变质了,所以用一根柱子作对比。
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yinge[使用道具]
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看过柱效吗?也许短柱子是没有分离而己。
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  • miracle   2009-9-29 16:23  专家分  +2   欢迎参与技术交流!
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同意楼上,可能是没有分离。如果方法成熟,很可能是柱子出了问题。
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是不是有杂质什么的呀,也可能是柱子使用时间太长了?
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