做液相时色谱柱柱压总是变高，是柱子堵了？怎么办？

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标题:[未解决]做液相时色谱柱柱压总是变高，是柱子堵了？怎么办？

[未解决]本主题悬赏可用分 10

yyid[使用道具]
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发表于 2009-10-8 10:32 资料个人空间短消息加为好友

小中大

在做液相时色谱柱柱压总是变高，昨天做时，用纯甲醇冲柱是90bar,今天用纯甲醇冲柱是143bar。不接柱子时，压力为7bar，接柱子，不接检测器时，压力是124bar。柱压应该是117bar吧。当甲醇水的比例50：50 时，压力已经为324了。所以怀疑是柱子堵了。
我做的样品是中药急性子，油性成分比较多，先用石油醚回流了三遍，然后用乙醇-水回流。浓缩完之后溶剂几乎全是水了。用0.45um水系滤膜过滤后进的液相。
求助我这根柱子的堵塞原因，该如何解决。以后该注意什么事项。谢谢大家！！

wtz010[使用道具]
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发表于 2009-10-9 10:28 资料个人空间短消息加为好友

小中大

做你这样的样品时一般要在分析柱前加一个保护柱，不知你加否。
柱子堵了一般堵柱前端，你可以把柱子反流向接，出口端不要接检测器，用甲醇调1-2ml/min，冲洗2-5min，再正接柱子，看看有没有效果。反冲时间不宜过长！

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miracle 2009-10-9 17:23 专家分 +3 thanks for your help!

九指神丐[使用道具]
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发表于 2009-10-9 10:48 资料个人空间短消息加为好友

小中大

要加保护柱的

ttkl533[使用道具]
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发表于 2009-10-9 17:13 资料个人空间短消息加为好友

小中大

你机器压力增大时，可能是过滤筛板污染，可以将柱头螺母卸下取出滤片并将其在20% 的硝酸溶液里超声波清洗约15 分钟，再用纯水超声波清洗10 分钟，重新装入色谱柱；
你怀疑是色谱柱问题那么建议：色谱柱的再生
A. 反相柱分别用甲醇：水=90：10，纯甲醇，二氯甲烷做流动相依次冲洗，每次冲洗体积为柱体积
的30 倍，然后以相反顺序冲洗；
B. 正相柱分别用正己烷，异丙醇，二氯甲烷，甲醇做流动相依次冲洗，每次为柱体积的30 倍，甲醇冲洗完以后再以相反的次序冲洗，至正己烷。注意使用流动相必须严格脱水。

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