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标题:[已解决]请教ESI和APCI源都可以很好的检测糖苷吗?

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100sjl[使用道具]
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请教ESI和APCI源都可以很好的检测糖苷吗?

我分别尝试用ESI和APCI源,离子井检测器,检测糖苷,感觉APCI源的检测效果更好,所以写了篇文章题目想强调APCI源:HPLC/APCI-MS同时检测....糖苷。专家的意见是:糖苷的鉴定与采用ESI还是APCI的关系不大,但与采用单四级杆(单级质谱)还是离子阱质谱(串联质谱)关系较大。所以让我把题目改成HPLC/IT-MS....检测糖苷。虽然很多人认为糖苷极性大更是适合用ESI,可我作出的结果就是APCI检出的更多(我个人分析),而且我觉的选择离子源是很重要,所以对专家提出的意见并不是很赞同。请各位高手给点意见!

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troy.tper.lee[使用道具]
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2最佳答案
 
有个问题还是不太明白:
“楼主所说的检测糖苷是怎么回事?定性还是定量?想只是普通的全扫描还是多级碎片?或者是未知化合物的结构解析?”
我觉得不论选择离子源还是分析器都和实验目的有很大的关系。

根据上面的情况,分析是对未知化合物中已知结构和性质的糖苷进行检出。如果是这样的话,应该是一个系统的过程:先进行一级全扫描,对检出目标质荷比的化合物进行选择离子扫描和二级碎片解析,若二级碎片就已经有比较明确的特征碎片存在(标准品试验、可信文献、关于裂解的一些小软件),则可以确定此化合物。若没有达到确证目的,则进行多级碎片分析,只至达到目的。
如果情况如上述:则常规质量分析器的考虑顺序如下:离子阱(10级)>线性离子(3-4级)>串联四极杆(2级)。但,其实离子阱的多级碎片一般也很难做到10级,首先,离子阱扫描范围并不是特别高,常见化合物一般情况到四五级都完全可以确证出来了。再次,从所周知,每多一级,信号就会衰减,当10级的时候,信号检出上可能已经出问题了。真正的10级可能也就是标准品高浓度,实际样品中的检出一般达不到。所以,如果只是进行常规已知结构等的检出,只需要找到其特征碎片,进行MS,SIM,MS2或MS3,甚至MRM,只要能确证出来就可以了。另外,有些厂商的仪器有相关扫描的方式,这方面就很有优势,可以设置为进行全扫描,当信号高于某个阈值时,同时进行二级碎片扫描,可以节省时间,提高工作效率。
如果分析样品是人工合成或天然分离的已经出较纯的化合物,想进行未知结构表征,建议质谱方面需进行高分辨确定分子量和分子式,再用离子阱进行逐步的解构确证,另外,还得结合红外、紫外、核磁等共同确证。
真对糖苷而言,质量分析器只是个检测器,能达到目的就可以了。相对而言,源的选择也不可乎视:糖苷的离子化效率还不错,但源内裂解很严重,糖苷键是最易裂解的地方(但检测时难度和问题不大,因为可以和原形药物分开,到时只需要确定出是那种结合糖的裂解),苷元母环上的羟基和侧链上的羟基往往也会裂解,而且几乎都是不可避免的,也很难鉴定,需特别注意。ESI源和APCI源基本上都有此情况。对于这些不可避免的问题,建议在离子化充分的前提下尽量适当的减小源电压和源内温度,尽量减小裂解程度,至于具体选择源还是以实验结果为准。实在不行可以尝试APPI和CPPI。
我们以前对多个糖苷进行过同时定量,也对其个别进行过代谢物的鉴定,难度很大,基本上使用的是串联四极杆和线性离子阱,ESI源,正负离子切换。
对于编辑的提问,我个人认为两种结论都可以,但要说明充分的理由。
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white-rabbit[使用道具]
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选择ESI和APCI源与化合物的结构、化合物的极性、流动相、添加剂等有密切关系,化合物可能两种模式下都挺好,可能只有一种模式离子化好,可能两种都不好,以实际结果为准,理论只能作为参考。你尝试用ESI和APCI源后,认为APCI源的检测效果更好,这没错,一定是APCI源好。
但是糖苷的鉴定,这里强调鉴定,离子阱质谱可以达十多级,而单级质谱只能得到一级信息,对化合物的鉴定离子阱质谱明显优于单级质谱,ESI和APCI源的检测效果好坏只于响应强度有关,与鉴定关系不大,专家从这方面理解的,所以专家的说法还是有一定道理的。
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hangtj[使用道具]
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这类药品分析经验不多。好象都不易。

含氧化合物ESI不易离子化,APCI易分解。

根据专属性权衡选择吧。
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dingdang[使用道具]
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5
 
我请教了一个专家,他回复如下:

1)首先,糖苷类化合物极性一般比较大,一般都适合用ESI和APCI来进行检测。但具体化合物结构类型不同,在其他条件一定时,或许在其中一种源下离子信号响应较好。其实,离子响应程度除了与结构有关外,还与其很多其它因素有关,比如流动相,仪器参数等。

2)至于糖苷的结构鉴定,应该与质谱仪有关。一般而言,离子阱质谱可以靠其多级性(理论上可以多达10级,甚至更多级)而得到更多的碎片信息,比单级质谱和四极杆质谱(一级和三级)要优越。
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龙歌笑[使用道具]
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离子阱在检测糖苷方面应该优于单四级杆。离子阱的MSn功能提供的是逐级打碎的多级质谱图,可以得到更多的结构信息,譬如,含有多少糖单元,含有几个葡萄糖(分子量丢失162),含有几个阿拉伯糖(分子量丢失114),含有几个鼠李糖(分子量丢失146)。至于ESI好还是APCI好,还没有研究过。但是APCI的一级图谱会有一些碎片峰出现,我想很多糖单元在一级APCI的蒸发室里可能就裂解了。我觉得还可以试试负离子,说不定效果不错呢
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100sjl[使用道具]
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非常感谢各位专家建议和指导!谢谢!

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