液相色谱

我用的是Agilent  XDB C18(4.6*50mm,3.5um)的色谱柱，流动相是乙腈—磷酸溶液（用氢氧化钠溶液调ph=3.0）（30：70）来分析某样品，前段时间出峰一直很正常：溶剂峰、杂质峰和主峰的峰形都很好，主峰后面有一杂质峰，与主峰的分离度约1.8。
但今天我再用这根柱子分析同一样品时，溶剂峰仍然很正常，但主峰却很宽，峰高也很低，像趴着一样，主峰后面的杂志峰也根本看不出来。我换小了定量阀，后来也稀释了下样品再进样，结果还是这样。难道是柱子不行了吗？可是溶剂峰还是很正常的啊。急请各位帮忙解答一下。

柱子的维护做的怎么样？

溶剂峰没有保留，没有参考意义

我也有同样的问题，期待大侠们解答！

柱效降低了，补一下柱头，超声清洗一下筛板或更换新筛板。

再然后，重新配制流动相试一下！

缓冲盐流动相分析完，一定要注意柱子的冲洗。

柱效降低了。如果平常柱维护较好。多冲一段时间试试。缓冲盐的流动相，用完要及时冲

做完样品用5%的甲醇水冲洗没有？

多平衡一段时间看看。

看样子是柱效下降了，可能柱子没维护好，用甲醇水好好洗洗，其次流动相配得准不?

如果是使用buffer，要注意及时冲洗系统，包括柱子。

另外，pbs溶液很容易变质，室温放置一天多就发白。

另外，注意看看那个溶剂过滤的东西，例如agilent 1100有那个PTFE frit，也会带来问题。

样品有什么差异没有？难道没有杂质了？主峰正常吗？更换更小的定量环，只会减小峰面积和峰高，出峰时间也可能会提前一点。

“溶剂峰没有保留，没有参考意义”，完全同意。
明显是柱效降低了，既然方法没变，那就是柱子变了，好好冲冲柱子吧！