食品分析者

用费林试剂测还原糖时，标定菲林试剂时，用的标准葡萄糖的体积为V0=12.2ml。测样品中还原糖时，竟然用了V1=14.5ml标准葡萄糖溶液。还原糖含量计算公式=（V0-V1）xcxn/10,按照滴定出来的结果，结果是负的。麻烦大家帮我分析分析，这是怎么回事？样品是我从宜宾芽菜中提出来的

我测过很多种类样品，没有碰到过结果是负的。
“测样品中还原糖时，竟然用了V1=14.5ml标准葡萄糖溶液”，难道你 在样品测定中，装在滴定管中的，不是样品提取液而是标准葡萄液吗。

我都咩有看明白你究竟是怎么弄的！

怎么说了半天，样品液呢……

楼主将公式中的V0，V1理解有错误吧，请将标准好好看看哟。

标定，是用基准试剂确定固定量氧化剂可氧化糖的能力。这个过程，用标准糖为滴定液。
测定样品时，以样品液为滴定液。
您对实验的表述，让人糊涂。

2种可能。
一是你计算式错了。
二是样液偏离中性大多。猜的，这个不知道有没有影响。

在提取多糖的倒第二步是把粗多糖溶液调到pH=4.5后加入三氯乙酸除蛋白，之后就没调过pH,样品的pH应该很低，这对实验结果有没有影响？

加热时我用的时电磁搅拌器，温度上升的有点慢。，大约1分钟半才沸腾，是不是这样的话，用的葡萄糖标准液的体积会变大？

在提多糖时，我没有除色素，也没有脱脂。这样的话，对用硫酸苯酚法测糖的总量和菲林试剂测还原糖有没有影响？本人是新手，知道的实在是少，还望各位多指教。

滴定操作错啦吧，标定菲林试剂的时候用标准葡萄糖液，样品测定的时候是用样液滴定标定过的菲林试剂啊！同时样品在测还原糖时，必须先除蛋除脂。

在滴定过程中，当亚甲蓝被还原成无色时，即为终点，但是无色的亚甲蓝隐色体与空气接触后又会恢复原来的蓝色。因此整个滴定过程必须在沸腾中进行，液面覆盖着水蒸气，以避免亚甲蓝与空气接触。

楼主使用的滴定方法我们也常常用到，一般在样品液的还原糖含量很低时采用，因为样品本身浓度低，直接用样液滴定的话可能远远超过10mL，需要的滴定时间也会跟标准标定时相差较大，因此可以在菲林试剂中直接加入定量的样品液后继续用葡萄糖标准溶液滴定，这样可以保证滴定的读数在可预计的范围之内。
但是，现在楼主出现的问题是加了样液之后反而比直接用葡萄糖标准溶液滴定消耗更多的标液，这只能说明加入的样液起到了跟葡萄糖反应的作用（类似于菲林试剂本身了），
此外要么就是操作过程的“不平行”引起的，比如滴定温度、速度、时间，或者其他实验条件。先要确保用葡萄糖标定时平行够好哦！

楼主将检测的规范传上来，有可能规范有问题，你先看看GB/T5009.7——2008的标准，与你的检测规范对照一下，不应该是标准溶液作为滴定空白。