液相色谱

在网上搜索不到更多关于该柱的介绍, 配的说明书中也没有太多的说明,如:PH值范围,流动相系统(除了推荐用的乙腈-水系统外,还能用其它种类的流动相吗,能加酸加碱和加缓冲盐吗?),等等,不是很明了,如果是柱效降低了,能用啥合适的再生方法没有?
望有这方面经验的老师多多赐教,越全面越好,非常感谢!!!

楼主测的是什么糖？

没有测过，你可以和柱子厂家联系，咨询他们

上Waters的官网down使用说明及注意事项吧，连接如下：

High Performance Carbohydrate Column Care and Use Manual

cuturl('http://www.waters.com/waters/support.htm?locale=zh_TW&lid=10072662&cid=511442&type=USRM')

cuturl('http://www.waters.com/webassets/cms/support/docs/wat056972.pdf')

谢谢你提供的信息,这个与我手中的使用指南是一致的,还是有些问题不清楚,如能耐受的PH范围等....

测糖专用柱 测糖的效果应该不错的。除了乙腈和水以外 还可以用纯水 但是这个的稳定时间要长。

　　通常的糖测定柱都是离子交换原理的柱子，因此可以适当地调整一下pH，只是不要用强酸强碱来调，用氨水、甲酸、乙酸之类的弱酸碱有机物来调(特别是对LC-MS尤为重要)，最好不要引入无机离子。

　　柱效降低了以后可以用流动相反复梯度洗(白天做样品，晚上洗柱子)。

　　其实在每个样品走完以后，一定要将溶液梯度走尽头(如用水到乙腈梯度，样品可能在60%乙腈就分析完了，后面一定要走到100%的乙腈，然后再回到100%的水相，各走10倍柱体积左右，然后再回到起始状态，约10倍柱体积后再开始分析下一个样品)，这叫用时间换柱效...

[ 本帖最后由 jiangxn 于 2009-11-13 11:22 编辑 ]

　　毫无疑问，问题中提到的色谱柱是氨基柱。该柱分离糖类的流动相只有乙腈-水体系，可以适当的在流动相中加入醋酸铵配成缓冲液。但要避免使用酸或碱作为添加剂，避免酸的原因在于氨基会和酸作用形成阳离子，导致氨基和糖之间的氢键作用降低，对保留不利。固定相是硅胶基质，加入碱柱会被破坏。柱效一旦降低，没有合适的再生方法。

1. 流动相通常为65-85%乙腈/水溶液，不用别的溶剂；温度在20℃到70℃之间调整；
2. PH值可用缓冲盐微调，不要加强酸强碱；
3. 若柱效降低，用流动相走梯度，长时间冲，我们实验室有根柱子柱效降低后连着冲了好几天，比较费时间，但是比较有用。

这根柱子的PH值范围是2-8，但一般会在3.5-7.5的范围使用；最大流速限是3.0ml/min；使用完之后保存在纯乙腈中，不能保存在缓冲盐中；流动相不能使用含柠檬酸盐的缓冲盐。

这根柱子的填料是硅胶基质键合氨基，所以如果流动相中水的比例过大，都会有柱流失产生;同样如果把乙腈换做甲醇也是同样的问题。