小中大不知你是看什么文献上说用"用带his tag的融合蛋白挂在镍柱上,然后通过缓慢的urea梯度洗,让它挂柱复性的",如果是国内的,那你就没有必要在意了,可能是在造假.用这种方法是很难的,你降低urea浓度只能使之沉淀,并不能改变什么.不象在疏水柱上,蛋白的疏水区域与填料结合了,你降低urea浓度不会使之马上沉淀,从而起了一个复性的过程,因为大家多知道复性过程集聚沉淀大部分是由于疏水区域在发生作用的.我也试过"用带his tag的融合蛋白挂在镍柱上,然后通过缓慢的urea梯度洗,让它挂柱复性的",但也没成功