液相色谱

这段时间我分析的样品是不溶于水的，于是用乙腈-水做溶剂来稀释样品。色谱柱是Agileng XDB C18(250*4.6mm,5um)，流速是2.0ml/min。流动相是辛烷磺酸钠溶液-乙腈（60：40）。辛烷磺酸钠溶液不是很浓，是由4.35g辛烷磺酸钠用2000ml水稀释得到。每天分析结束后我都用水-乙腈（60：40）先冲洗柱子100分钟，再换纯甲醇冲洗100分钟。第二天用时先用水-乙腈（60：40）过30分钟柱子后再换流动相。可是就这样做了大概50针样品后。柱子就柱压特高，柱效降低，拖尾造成主峰后相邻杂质峰分不开。我真的很困惑，请各位帮帮忙。谢谢!

你不加柱子时，压力大吗？ 还有能不能说说你是什么样品，应该不是保密产品吧！看到柱子了，刚没看清，呵呵你用的柱子好长呀！我做了这么久还没有用过这长的柱子，还有你做的时候是不是开始效果还好，越靠后越差呀！

柱压高可能是系统堵了，但不知道杂志分不开是什么原因，建议可以打安捷伦客服问问，他们大部分问题都可以帮助解决的

　　个人意见：

　　1.你的柱子是不是新买的柱子，如果是旧的，可能是柱子有问题了。。

　　2.样品处理的不行，或流动相没有过滤，导致进入柱子的杂质过多。建议检查一下purge阀滤芯堵了没。。。

　　3.你的流动相用的是辛烷磺酸钠溶液，辛烷磺酸钠一般属于离子对试剂，其一般推荐浓度是0.005mol/l，而且会对色谱柱有一定损伤。你用辛烷磺酸钠溶液，我猜测你可能在分离碱性物质。你所配制的溶液浓度有点大，达到0.01mol/l。

　　4.还有你的流速较高，一般来说，agilent机器的最佳流速应该是1.0左右。流速较大则柱压较高。

　　5.虽然agilent XDB C18是封端柱，但对于分离碱性物质还是有可能造成拖尾现象的，建议加0.10%的三乙胺。。。

柱压高，可能柱滤片堵塞，柱头污染，不知样品脏不脏。还有冲洗柱子时用水-乙腈（60：40）冲洗柱子后你如要用纯溶剂冲的话，就用乙腈如何?

“2ml/min的流速”，流速好快啊

连续大量进样检测时，最好在中间适当的时候冲洗一下柱子。因为每一针进样后或多或少会有样品残留在柱子里。累积多了，会有影响。

另外，想问一下有没有设柱温，室温太低时，柱压会相对较高。设个25C柱温，会好一点。

柱压高，可能是柱头堵了

先换根柱子确定一下是不是柱子堵了

样品用流动相稀释后，过多少的滤膜？

冲柱子，把水的比例加大，用90%的多冲冲

还有，就是你的使用流速有点大，对柱子不好

离子对试剂对色谱柱的损害比较大，有没有试过降低一点离子对浓度是否也能达到分析要求？样品是否成分比较复杂？可能色谱柱有污染，如果有保护柱的话，反冲一下保护柱试试。可以换成10%乙腈洗柱看看。

"我分析的样品是不溶于水的",也就是说你的试剂不是离子，为什么要采用离子对试剂了？而且你用的流速很高，系统压力会升高，在这种情况下，辛烷磺酸钠很有可能析出来堵塞系统和柱筛板。

首先要分清是系统堵了或是柱堵了.取掉住看看主压就可以分清

楼上各位朋友都回复得很详细，一同学习了。呵呵！！