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标题:[未解决]【求助】小球藻(细胞壁)破碎方法

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grace![使用道具]
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【求助】小球藻(细胞壁)破碎方法

求助小球藻的破碎方法,我试过了研磨和超声波破碎方法,效果都很差,破碎率不到百分之20,由于小球藻细胞壁很坚固,所以求助各位大虾,帮帮忙,我已经素手无策了。
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舞疯[使用道具]
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超声波破碎时间可以适当延长试试,或者利用纤维素酶等来破碎
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kaixinjiuhao[使用道具]
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加强酸沸水浴暴力破碎~
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这些要看你的目的是什么了,如果只是把小球藻破碎、测定蛋白含量,你可以利用高温加热破碎;但你想利用其胞内酶进行实验研究,那你研磨就不行了,会损坏酶活性。你可以通过增加超声破碎功率,一般为20%(细菌),你可以适当增加。同时,你还可以延长破碎时间。
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我用过不同方法,冻融、研磨、超声,实验证明,冻融法做好。将离心好的藻留少许水分,-20度下冷冻,然后40度溶解5分钟。如果对酶活有要求,就4度溶解。
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0.5mol/LNaOH煮沸15min,一次不行重复两次就可以了。这种方法提取蛋白质是没有问题的。超声实际上很多时候不能把细胞壁破碎的,我一般都是冷冻一夜后用加碱煮沸的方法。
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