小中大新一代反义药物前瞻分析
反义技术一经面世，即引起人们关注，成为近年来新药研究和开发的一个热点。但是到目前为止，尽管科学家已经破译了人类基因组的完整序列，但对于基因产物影响疾病进程的整个过程仍然存有许多不明之处。近年来，利用第一代反义技术开发的新药频频受挫，不禁让人对此颇感失望。专家认为，其中的原因是多方面的。例如，某些反义药物无法使靶基因（即所谓"致病基因"）序列完全沉默，与疾病真正有关的靶基因尚不明确等。
不过，随着遗传基因实验技术的不断改进，人们发现，无论是在药物靶标的确认，还是在先导候选药物的筛选方面，直接靶向于信使ＲＮＡ（ｍＲＮＡ）的反义治疗策略都具有更好的时间－效益比和成本－效益比。正因如此，新一代的反义治疗技术仍然受到众人青睐，并得到不断发展。
第一代反义药物有待改进
硫代磷酸酯寡聚脱氧核苷酸（Ｐｈｏｓｐｈｏｒｏｔｈｉｏａｔｅ ｏｌｉｇｏｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ，ＰＳ ＯＤＮ）是第一代反义化合物的主要代表，也是迄今研究最多和应用最广泛的反义寡聚核苷酸。其主要缺点是对靶ＲＮＡ分子的亲和性较低以及存在某些毒副反应。比如，ＯＤＮ能与某些蛋白，特别是那些能和带有多个负电荷的分子相互作用的蛋白（如肝磷脂结合蛋白）产生非特异性结合，从而引起细胞毒性；又如，ＯＤＮ中的ＣｐＧ模体（ＣｐＧ ｍｏｔｉｆ）有可能在哺乳动物体内诱发先天性免疫反应，给机体造成多方面的损害。研究发现，改变给药方式和给药剂量可以降低这种全身性免疫反应的危险性。不过，即使是采取缓慢静脉输注方式，第一代反义ＯＤＮ药物也不可能得到广泛应用，这主要是因为科学家尚未找到合适的药物传输系统，无法将足够浓度的药物输入靶细胞，因而也使得反义ＯＤＮ药物不能有效抑制靶ｍＲＮＡ的表达。
目前惟一被美国食品药品管理局（ＦＤＡ）批准上市的反义ＯＤＮ药物是Ｉｓｉｓ制药公司生产的福米韦生（Ｖｉｔｒａｖｅｎｅ，ＩＳＩＳ２９２２），此药由２１个硫代磷酸酯寡聚脱氧核苷酸组成，核苷酸序列为５＇－ＧＣＧＴＴＴＧＣＴＣＴＴＣＴＴＣＴＴＧＣＧ－３＇，主要用于治疗艾滋病患者并发的巨细胞病毒（ＣＭＶ）性视网膜炎。由于福米韦生是通过眼内直接注射给药，因而不存在反义药物进入靶组织剂量不足的问题。
其他几种通过全身给药的第一代ＯＤＮ反义药物目前仍然处于临床开发阶段。不过，最近接二连三的失败已经沉重打击了人们对这类药物的信心。
奥利默森钠（ｏｂｌｉｍｅｒｓｅｎ ｓｏｄｉｕｍ， Ｇ３１３９，商品名为Ｇｅｎａｓｅｎｓｅ）是Ｇｅｎｔａ公司和安万特公司共同开发的一种Ｂｃｌ－２靶向抗癌药，其成分为１８－基体硫代磷酸酯寡聚脱氧核苷酸，直接针对Ｂｃｌ－２ ｍＲＮＡ开放阅读框的前６位密码子。各种细胞系的临床前研究表明，Ｇｅｎａｓｅｎｓｅ能诱导Ｂｃｌ－２ ｍＲＮＡ核苷酸序列的特异性降解，抑制Ｂｃｌ－２蛋白的表达。然而，今年５月３日，美国肿瘤药物咨询委员会（ＯＤＡＣ）在审核了Ｇｅｎａｓｅｎｓｅ治疗转移性黑素瘤的Ⅲ期临床试验结果后却认为，以患者的反应率和存活率来评价，静脉给予Ｇｅｎａｓｅｎｓｅ并没有带来什么实质性疗效，反而是增加了原有疗法的毒副作用。为此，ＦＤＡ于６月否决了此药的上市申请。有意思的是，ＯＤＡＣ也承认，Ｇｅｎａｓｅｎｓｅ在临床试验中也表现出一定的肿瘤反应率，不过，导致这种治疗作用的原因究竟是反义药物所引起的肿瘤细胞减少，还是药物中含有的ＣｐＧ模体刺激产生的免疫反应的结果，目前尚存有争议。
Ａｆｆｉｎｉｔａｋ（Ｉｓｉｓ－３５２１， ＬＹ９００００３）是礼来和Ｉｓｉｓ制药公司共同开发的一种作用于蛋白激酶Ｃ－的反义抗癌药，主要用于治疗晚期非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ），目前正在进行第二项Ⅲ期临床试验，其结果预计将于今年底公布。不过，在去年３月结束的第一项Ⅲ期临床试验显示，Ａｆｆｉｎｉｔａｋ并不能显著延长患者的生存时间。
第二代反义药物令人期待
为了解决第一代反义药物的种种问题，科学家们作出了许多尝试。比如，采取２＇－Ｏ－烷基化、吗啉化、磷酰胺酯化（ＮＰｓ）、肽核酸（ＰＮＡ）、核酸锁（ＬＮＡ）、六元环核酸或三环ＤＮＡ等多种方式，对反义药物的骨架结构进行适当的修饰，从而提高了反义药物的靶标亲和性、核酸酶抗性，减少其毒副作用，避免免疫反应的产生；此外，还通过一些重要的化学和制剂改造，改善了反义药物的稳定性，增加了口服、灌肠等新的给药途径。目前，部分第二代反义药物已经进入临床开发阶段。
在第二代反义药物开发领域，Ｉｓｉｓ制药公司拥有核心专利技术，它与合作者共同开发的数种第二代反义药物已经或将要在今年进入Ⅱ期临床试验阶段。另外，Ｈｙｂｒｉｄｏｎ和Ａｅｇｅｒａ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ公司也有数种第二代反义药物进入Ⅰ期临床试验。在早期实验中，各种第二代反义药物都已经表现出明显的安全性，而且，某些药物的生物标志物分析数据表明，受试者体内的靶蛋白水平也出现显著下降。例如，今年８月，Ｉｓｉｓ制药公司公布了作用于载脂蛋白Ｂ１００的第二代反义药物ＩＳＩＳ ３０１０１２的Ⅰ期临床试验初步结果。在该安慰剂对照试验中，１９名受试者体内的靶蛋白水平在给药后出现了快速下降（幅度达到５５％），与此同时，受试者体内低密度脂蛋白胆固醇和极低密度脂蛋白胆固醇也出现了明显下降。
传统上，如果新药缺乏明显的临床疗效，那么它们在Ⅱ期临床试验中将很快被淘汰。但有研究者称，当某种能够有效降低靶ｍＲＮＡ及相关蛋白质水平的第二代反义药物无法取得预期的治疗效果时，首先应该确定药物靶标的选择是否正确，以及靶标与疾病的关系是否明确，如果答案是否定的，则所采取的反义技术可能与试验失败关系不大。
ＲＮＡｉ：下一代产品的催化剂？
从理论上讲，ＲＮＡ干扰（ＲＮＡｉ）技术比传统的反义技术更适合用于抑制ｍＲＮＡ序列的功能相关性表达，ＲＮＡｉ技术的出现重新点燃了人们对反义技术研究领域的兴趣。尽管ＲＮＡｉ技术在新药开发领域的应用仍然处于起步阶段，但是一些生物技术公司和制药企业已经在致力于研发用于疾病治疗的小干扰ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）。科学家在反义药物开发过程中吸取的教训将有助于减少人们在开发ＲＮＡｉ技术时所犯的错误。例如，科学家已经知道，需要在实验中使用合适的对照以证明靶基因的抑制是特异性的；此外，研究人员也找到了不同的方法来预防长双链ＲＮＡ序列所诱发的哺乳动物的干扰素应答反应（ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ ｒｅｓｐｏｎｓｅ）。
Ａｌｎｙｌａｍ和Ｉｓｉｓ公司目前正利用后者所拥有的核酸治疗领域方面的专利技术共同开发ｓｉＲＮＡ药物。迄今尚未有基于ＲＮＡｉ技术的新药进入人体临床试验阶段，不过，Ａｃｕｉｔｙ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ和Ｓｉｒｎａ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ公司最近已经向ＦＤＡ递交了新药临床研究申请，预示着相关人体临床试验即将展开。
ｓｉＲＮＡ药物真的适于人类使用吗？ＲＮＡｉ及其相关技术会成为通过抑制靶ｍＲＮＡ表达来治疗疾病的下一代新药开发技术吗？人们拭目以待。
未来展望
靶向于ｍＲＮＡ的反义药物的发展过程似乎与单克隆抗体有点相似：最早出现的鼠源性单抗也是因为可能出现的免疫毒性反应而使其临床应用受到制约，不过，随后出现的嵌合型单抗、人源化单抗，乃至全人源性单抗则让单抗药物不断走向成熟，最终发展成为目前市值达数十亿美元的药物市场。
据专家预测，大约再过１年至１年半时间，几种第二代反义药物的临床试验结果就会陆续公布，到那时，人们对反义药物的前景将会更为清晰（见表１和表２）。此外，首个基于ｓｉＲＮＡ技术开发的新药也会在这段时间内进入人体临床试验，到那时，人们将对这种技术在人体内的安全性有个初步了解。
