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标题:[未解决]氨基酸的理化性质分析

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xuaner1212[使用道具]
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氨基酸的理化性质分析

大家好。我想问一下。
          我的做1,4-对氨基苯与FITC(异硫氰酸荧光素)反应的时候。其条件完全是按照蛋白质的氨基与FITC 的条件。即氨基与异硫氰根的反应条件进行的。但是却标记不上。不知道是不是苯环上的氨基具有惰性?还是反应条件不适合?有哪位高手指教一下!谢谢啊
  同时我还想问一下氨基和异硫氰基的反应原理及条件?
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  • miracle   2009-11-16 21:42  可用分  +1   已有热心朋友回复 请您及时回应 ...
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aa_tang[使用道具]
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氨基和异硫氰基的反应,从有机反应机理上来讲属于亲核加成反应。

氨基酸分析,常采用异硫氰酸酯(FITC)为荧光标记物,在碱性条件下-NH2中氮原子与FITC异硫氰基上正电性碳原子发生亲核加成反应,使形成FITC衍生物,增强紫外/荧光吸收。

1,4-对氨基苯太钝,活性不高,楼主可以加点DMAP试试,或者用吡啶做溶剂,加热回流,看是否能反应。
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  • miracle   2009-11-16 21:43  可用分  +3   thank you very much!
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xuaner1212[使用道具]
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回复 #2 aa_tang 的帖子

谢谢您的解答。我还想问你一下我用什么试剂调pH值.FITC在碱性水溶液中易于甲醇和水进行反应。我是用甲醇和水做反应体系,然后用氢氧化钠调pH值,但是效果不好,您能给我一点建议?我看文献的时候看到氨基酸与FITC的反应时看到要用缓冲液,但是我觉得我这个体系,没必要用缓冲液,不知道对不对。望您解答,谢谢啊
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  • miracle   2009-11-17 12:31  可用分  +2   欢迎朋友提问 互相交流!共同进步! ...
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aa_tang[使用道具]
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回复 #3 xuaner1212 的帖子

苯胺类FITC衍生,没有亲自做过;
我们在做氨基酸衍生的时候,是用有机碱三乙胺(TEA)调碱性的,个人觉得没必要使用缓冲液。在碱性条件下反应即可。

具体到楼主的情况,偶也不太清楚。建议咨询一下做有机合成的同行。
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五谷为养[使用道具]
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手性分析应该怎么样分析亚,用到什么一起呢
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aa_tang[使用道具]
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回复 #5 五谷为养 的帖子

手性分析跟我们平常的分析是一样开展的,只是需要提供一个不对称的环境(手性色谱柱or手性流动相添加剂法)或者是通过柱前手性衍生消除手性,使对映异构体转换成非对映异构体,接下来的分析就没什么特别的了。
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  • miracle   2009-11-18 20:35  可用分  +3   谢谢群主提供全面见解!
  • miracle   2009-11-18 20:35  专家分  +3   谢谢群主提供全面见解!
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