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标题:【求助】蛋白纯化

rxcc33[使用道具]
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发表于 2013-4-17 11:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】蛋白纯化


大家好，我在做蛋白纯化，用一个不到1000的分子量物质标记分子量为16万的蛋白，标记后想把未标记上的多余的小分子物质出去，我现在用葡聚糖g-100纯化，可使不可避免会有小分子夹杂着出来，反复提纯又会造成目的蛋白丢失，因为标记的目的蛋白是单抗很贵的，所以请问大家有什么好的方法吗谢谢指教
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发表于 2013-4-17 11:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 rxcc33 于 2013-4-17 11:14 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

大家好，我在做蛋白纯化，用一个不到1000的分子量物质标记分子量为16万的蛋白，标记后想把未标记上的多余的小分子物质出去，我现在用葡聚糖g-100纯化，可使不可避免会有小分子夹杂着出来，反复提纯又会造成目的蛋白丢失，因为标记 ...

用脱盐柱脱下盐不就OK了？
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rxcc33[使用道具]
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发表于 2013-4-17 11:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

另外我想问一下，小分子化学物质在SDS蛋白电泳上能跑出条带吗，
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发表于 2013-4-17 11:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
用透析的方法，找一个截留量为十几KD的透析袋试一下，

另外用超滤我觉得也可以试试
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rxcc33[使用道具]
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发表于 2013-4-17 11:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

截留量为十几kd的透析袋可以截留住分子量为500的小分子化学物质吗，我不太会换算，呵呵超滤原理我今天回去想想 谢谢你啦，对了方便把你的邮箱或者电话什么的给我吗？万分感谢。
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发表于 2013-4-17 11:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
G100太大，用G25就可以了。G25是大过5kd的就在筛外，完全可以与16kd的分开。
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发表于 2013-4-17 11:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
用Amicon Ultra-3KD 离心超滤管
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rxcc33[使用道具]
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发表于 2013-4-17 11:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 49888 于 2013-4-17 11:20 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
用Amicon Ultra-3KD 离心超滤管

原理上是这样，可是事实上不是
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发表于 2013-4-17 11:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

如果是蛋白之间存在互作结合，那就得想办法先解离吧
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rxcc33[使用道具]
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发表于 2013-4-17 11:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
不是的，是用一个小分子标记一个大分子的，然后想去掉小分子的物质
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