液相色谱

我查看文献，我们国家也有农业行业标准。果汁中展青霉素测定

他们的色谱条件是C18,5μm,250mm*4.6mm。0.8%四氢呋喃-（水），流速1.0mL/min。他们的出峰时间是10min

标准品买的是sigma的色谱纯，条件跟他们都一样，就是不知道C18柱里面的填料可能跟他们不一样，我用的C18填料是sinochrom ODS(文献的填料不清楚)。后来我跑标准液，10分钟时硬是没出峰，我以为标准品坏了，后来有一次无意中跑了20几分钟，发现在23min的时候出峰了。

怎么我的保留时间和文献报道差那么多呢。

后来我改用10%乙腈-（水）把保留时间提前到10min.可是看我国2003年的一些文献，他们10%乙腈的保留时间又是4.5min.

为什么我的出峰时间怎么跟他们差异这么大呢。是什么原因呢。难道是我的标准品有问题，可是sigma公司的标准品也会有问题吗？

看看标准中用的什么仪器，仪器不同差异会很大的；还有就是像你说的，可能是柱子填料不一样。C18填料分很多种的。

我用的是

waters 590，C18,5μm,250mm*4.6mm。

(0.8%四氢呋喃，t=23min)   (10%乙腈，t=10min),

他们用的

农业行业标准：HP1100，C18,5μm,250mm*4.6mm

(0.8%四氢呋喃，t=10min)，

其中一篇文献：waters 600，C18,5μm,150mm*4.6mm(他用的是短柱)

(10%乙腈，t=4.5min)

这些条件会使保留时间差异这么大吗？还是有其他原因呢？

谢谢大家指导了。

是你的色谱柱的原因，柱子的长短对保留时间影响很大 另外，即使是同一样的填料，不同的厂家保留时间也有差异的

应该是填料差异，很正常的，所以药典都是容许调整流动相比例的。

那填料差异是导致我的保留时间跟他们不一样的主要原因吗？

我自己做的时候保留时间是比较一致的，但是这几天天气冷了，没有柱温箱，保留时间往后延迟了一点是正常的吧。

色谱柱之间是存在填料差异而引起不同的保留结果，最好用同一品牌同一商品名的柱子之间进行比较。
另外，你的标准品有没问题最好用相关方法鉴别一下，因为毕竟买的不是“标准品”，标准品指的也不仅仅是色谱纯。

温度对保留时间确实有影响，后延一点也正常。

很有可能可能是你说的原因。


你可以改天重复夏天时候所做的其他品种样品看看是不是也是一样保留值增大。如果也是，你的分析就是正确的。

柱子的长短会有一定的影响。若是选择长度一致的柱子，影响应该小一些，但不会至于保留时间有那么大差别。

填料同类型，不同厂家生产，对峰形会有影响的。

还有，检测时，有没有用柱温箱是有影响的。

柱子和柱箱影响都是很大的，应该尽量条件一样！这样才有可比性！