液相色谱

如题：死体积的增加，会带来什么影响？ 谢谢大家赐教！！！

扩散与反混，影响分离度。

死体积本意是指色谱柱中未被固定相占据的空隙体积，也即色谱柱内流动相的体积。但在实际测量时，它包括了柱外死体积（色谱仪中的管路和连接头间的空间以及进样系统和检测器的空间）。

柱外死体积直接影响到了色谱柱的柱效表现。尤其是柱后死体积，如果太大就会造成已分离物的重新混合。
另外，柱前死体积同样不容忽视，太大造成样品分散过大，即增加了上样体积，最终影响色谱柱的分离效果。

[ 本帖最后由 猴子 于 2009-11-30 19:17 编辑 ]

简单的说就是分离度变差，峰型丑陋，达不到期望的色谱柱的理论塔板数！！

抛砖引玉：1.峰展宽。

死体积：不被固定相滞留组分，从进样到其最大有响应值时，所消耗流动相的体积。在流速一定的情况下与死时间成正比。

我认为死体积增大最为直接的影响就是保留值的增加。

另外还会引起“柱效”的降低（实际不是柱子，只是表征一样），也就是wangy版主说的峰展宽增加。
关于对峰展宽的影响，我理解的原因是这样的。样品在流动相里是有扩散性的，无论在色谱柱里还是在管路里都是一样。死体积大也就是说管路长（包括柱前和柱后），在柱前死体积大相对来讲就是进柱子是样品在流动相中的浓度低了，并且含有样品的流动相在管路里分布“长”了，这样虽然在柱子中同一物质会“聚集”在一起，当时相对死体积小的情况（即进柱子前是高浓度和“短”分布的样品分布）柱效和峰展宽要明显降低；柱后死体积也是一样，分离好的各组分，如果没有“及时”经过检测器，也会由于扩散作用而导致峰展宽加大，体现为柱效降低。

个人认为，柱后死体积对“柱效”影响更加明显（实际这里是对比死体积大小，本来是和柱效无关，姑且这么说）。

如果不好理解可以想象极端情况。柱前死体积如果“足够大”，有足够的扩散时间，就相当于把样品加入流动相中，就会的到极大的峰展宽（因为看不到峰，可以认为峰展宽极大）；在柱后死体积“足够大”，虽然样品在色谱柱中已经实现分离，但是由于在柱后到检测器之间有足够长的管理，也就是有足够长的扩散时间，最终会导致分离开的样品又重新由于扩散作用重合到一起，也会形成极大的峰展宽。

当然，极限情况是不存在的。当你死体积增大不多（一般也不会很多），最直观的表现就是保留值增加，但是如果增加很多而且室温较高的化，对峰展宽的影响就会看出来了。

个人理解。

死体积增加，保留时间增加！

谢谢大侠，你的个人理解比相关资料的解释更容易懂

峰扩展，会对分离度造成一定的影响，从而会对结果产生影响