蛋白质与蛋白组学

谢谢大家的精彩解答，本人受益菲浅，对与各位的疑问，大致有以下的解释，请各位深入知道：
　１．诱导表达时，ＩＰＴＧ是在摇菌ＯＤ值在０.５－０.６之间的时候加
入的，终浓度为１mＭ，加入后大概摇了三个小时左右．过夜培养有什么好处呢？
　２.　空载体的对照我是同时在做的．
　３.　分子量标准因为还没到货，所以我暂时没加．但我找不出其中有差别的带啊！！有一条带很明显，但是包括空载体都有那条带．
　４.　宿主菌和载体这套表达系统有人做过，应该没问题，可能存在的问题是我的蛋白可能是一种膜蛋白．是不是相对来讲诱导较难呢？
　５.　我的外源基因里没有什么稀有的密码子啊！！稀有是指哪些呢？
　６.　还有，我裂解的时间是按分子克隆上面指出的，４５－５５度１小时，有人建议我用１００度水浴１５分钟左右，因为假如是包涵体可能要那么久才能完全释放出来．你们觉得可行吗？
请各位继续指导．
　
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1 关于诱导时间，有时候蛋白质3个小时的时候表达量很低，电泳不易发现，在第一次左右到的时候推荐夺取几个时间点，一般在诱导时，诱导3小时，诱导6小时。当然也可以过夜。对一些容易降解的蛋白要减少时间了。
2 如果蛋白marker没有到货的话，可以用一些已知的相近分子量的蛋白来替代，象BSA，溶菌酶，等等，来做个对比，防止你的蛋白跑出泳道。
3 不管是膜蛋白还是包涵体只要你１００度水浴10分钟，就可以了，不存在包涵体不释放的问题。