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标题:【求助】有用过proteintech 公司的抗体吗

zranqi_1[使用道具]
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【求助】有用过proteintech 公司的抗体吗

proteintech group ,我们实验室大部分的抗体都是买的武汉三鹰代理的proteintech group的抗体,杂带很多,做出来的根本不靠谱,大家还有经常用这个公司抗体的吗,交流下经验
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ritou1985[使用道具]
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有用过,用过几个抗体,不是太差,有的抗体还好,浓度别太做高了,二抗也要稀一点,
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loli[使用道具]
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以前用过该公司的细胞因子,还可以,抗体没怎么用过。
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TNT[使用道具]
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用过他们的抗体,不过,还可以。不算最好!
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zranqi_1[使用道具]
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5
 


QUOTE:
原帖由 TNT 于 2013-4-27 08:48 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
用过他们的抗体,不过,还可以。不算最好!

感觉他们的抗体在肾组织中95那个位置都有一条很深的杂带,不知道有问题去哪反映
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orangecake[使用道具]
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回一楼的,杂带多考虑一下一抗或者二抗是不是太浓了,看看他们的Datasheet是不是也有杂带,如果Datasheet也有杂带,可以直接问一下是怎么回事,WB出现杂带的情况分很多种,各种修饰、酶切和自然降解以及泛素化都可能带来杂带,不见得不好。。。。。
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moonlight45[使用道具]
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武汉三鹰 重组蛋白作为免疫原做的多克隆抗体。
个人比较倾向于多肽做抗原的抗体,因为免疫原是已知的,得到的抗体表位也是在可以预测的范围之内,
CST epitomics的抗体大多数都是多肽做抗原,质量都不错。
或者蛋白得到的单抗做过pep-mapping的抗体,应该也是比较可信的。
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orangecake[使用道具]
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非常不赞同楼上的意见。
首先,用重组蛋白作为抗原,有很多不可替代的优点:包含的表位多,得到的抗体可以识别各种形式的靶蛋白,比如特殊糖基化、磷酸化、乙酰化、isoform,剪切体等,但是多肽制备的抗体很多时候应用受到局限。 其次,以目前的技术来看,大家还不能非常非常精确地预知最佳表位,免疫一个融合蛋白,可以让动物机体自身去反正,针对有一些特定的表位产生出来抗体可能会表现出很高的亲和力,这是多肽抗原不能比拟的。 最后,相对于多肽来说,用融合蛋白做的抗体可能会对其它不相关的蛋白质存在更大可能性的交叉反应,但是其理论信噪比是比多肽制备的抗体高一些的,理解起来可能有点废力,建议先看看这篇综述:Monoclonal Versus Polyclonal Antibodies: Distinguishing Characteristics, Applications, and Information Resources , 参考作者说多抗特异性比单抗强的那一段。 还有疑问请跟帖。
当然也有极端情况是融合蛋白没法完成的,比如说同一家族蛋白有很多相似区段,这时候只能用多肽去区分,另外,实在得不到融合蛋白时也必须用多肽,三鹰大约有10%的抗体就因为这两种原因而采用多肽。
CST和Epitomics不是所有的抗体都用多肽做的,个人觉得他们的质量关键在于质检把关,跟抗原选择关系不是那么大。想想Dako的抗体几乎都是拿天然蛋白作免疫原的呢。。。。
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orangecake[使用道具]
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P.S 用多肽做抗体还有一个优点就是成本比较低。。。 融合蛋白的生产成本相对来说要高许多。
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kswl870[使用道具]
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也见过某些公司客服活生生的把杂带说成了PTM,试问下,PTM 不要理论支持么?
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