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不贵.买试剂都不贵,都是分装的,总共配齐了大概700多一点吧
我想问一下战友，材料一共700，是很经济，但你加MMP-2、9 标准品了吗？？？？？？
我购买2种标准品就花了数千元经费。
下面就我所知，为各位即将做Zymography的战友提供点自己的经验：
1.做酶谱要测定样品蛋白的浓度（同Western blot，建议用BCA法，未做过的战友可在园子里搜一下）；
2.酶谱法是测定样品中MMP-2、9活性的，如果煮沸使蛋白变性就没有用了，故绝对禁忌煮沸；
3.上样缓冲液中也不能加β-巯基乙醇，这点由western blot转作明胶酶谱的战友切记、切记；
4.蛋白上样量必须保证一样，不会出现一致的透明条带，如果不能保证上样量一致，测出的相对活性也没有统计分析的意义；
5.上样时最重要的一点，必须在4℃环境中操作，我用的是冰台，同时所用的蛋白样品（-80℃冰箱）不能是以前曾解冻使用过的，必须是新取出的，因为只要解冻就会有部分酶降解，影响你的结果。此外做过一次酶谱的蛋白样品也不要反复使用，下次应使用其它已分装、未解冻过的样品；
6.电泳后的步骤很简单，液体别配错，照着方法做就可以了。
如果你曾做过Western blot，在这里恭喜你了，只要注意几个小细节，明胶酶谱对你非常简单；如果没做过，也不要紧张，多试几次一定成功。
我们实验室做过近一年的酶谱，因此有一点点小经验。有问题我们可以互相交流一下，祝好运。
