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标题:【求助】western曝光能看到荧光却曝不出条带

glass[使用道具]
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【求助】western曝光能看到荧光却曝不出条带


求助:为什么我做磷酸化蛋白曝光时能看到荧光,但是胶片上就是什么都没有呢?显影之后胶片和没使用过一样。
之前以为是显影液的问题,于是重新配了显影液。
胶片过期的话能继续使用么?前几次用时没有问题的。
求好心人解答!
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把空胶片直接显影试试。黑的就不能用了呗
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glass[使用道具]
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我试过了。空胶片直接显影以后拿出来看,和我拿去压片后的片子是一样的。在暗室里看是透明的,但是有光的时候看就不是透明的,整张片子浅绿色。是不是就是胶片的问题呢?
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难道你光显影不定影的?
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我试过了。空胶片直接显影以后拿出来看,和我拿去压片后的片子是一样的。在暗室里看是透明的,但是有光的时候看就不是透明的,整张片子浅绿色。是不是就是胶片的问题呢?

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显影后直接曝光就是绿色的。
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glass[使用道具]
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哦!就是说如果我显影后拿去定影,直接曝光出来就是透明蓝色,而不是绿色不透明的了?
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哦!就是说如果我显影后拿去定影,直接曝光出来就是透明蓝色,而不是绿色不透明的了?

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你这句话有歧义:直接曝光是胶片见光曝光以后再显影定影,还是胶片在暗室里直接显影定影。最好把意思或者图片直接贴上,我们能看一下。
怀疑胶片已经曝光就直接显影定影,出来的应该有黑色边缘,因为光首先曝光胶片的边缘,中间的应该是蓝色透明。如果胶片没有问题,出来的应该都是透明蓝色。胶片如果只经过显影,未定影,那么胶片出暗室应该是绿色不透明。另外,只要膜上有荧光,压片后,经过显影出现条带,哪怕不定影,出暗室后,胶片上还是有条带。只是胶片其他地方是绿色不透明的。
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glass[使用道具]
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您好,因为现在不在实验室,所以没法直接把图片附上,真是不好意思。
我把情况按您说的具体说一下吧!就是:我的膜上有明显荧光,但是在暗室里压片、显影后胶片上没有出现任何条带,一点变化也没有,所以我就没有把胶片放进定影液了。这样处理的胶片出暗室后是绿色不透明的。
于是我怀疑是胶片有问题,就取了一个新的胶片直接显影(没有去压片的),不过没有定影,出暗室后,这样处理过的胶片也是绿色不透明的。
整个过程都是在暗室里进行的,包括膜和ECL液的反应,显影,不过未定影,这些全部弄完以后,出了暗室。
第一次出现这种情况时我怀疑是显影液和定影液的问题,就重新配制了显影液和定影液。然后整个重做了一遍(从提蛋白开始),换新的显影液和定影液,结果还是这样。
谢谢指点!
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04906[使用道具]
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您好,因为现在不在实验室,所以没法直接把图片附上,真是不好意思。
我把情况按您说的具体说一下吧!就是:我的膜上有明显荧光,但是在暗室里压片、显影后胶片上没有出现任何条带,一点变化也没有,所以我就没有把胶片放进定影液了。这样处理的胶片出暗室后是绿色不透明的。
于是我怀疑是胶片有问题,就取了一个新的胶片直接显影(没有去压片的),不过没有定影,出暗室后,这样处理过的胶片也是绿色不透明的。
整个过程都是在暗室里进行的,包括膜和ECL液的反应,显影,不过未定影,这些全部弄完以后,出了暗室。
第一次出现这种情况时我怀疑是显影液和定影液的问题,就重新配制了显影液和定影液。然后整个重做了一遍(从提蛋白开始),换新的显影液和定影液,结果还是这样。
谢谢指点!

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你把膜和胶片隔开没有?
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glass[使用道具]
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隔开了,膜是用保鲜膜包着的
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