食品分析者

请教一下，大家在做多糖纯化，如何进行洗脱方式的选择？例如，在摸索纯化多糖时，我先用纯水进行洗脱，再进行Nacl洗脱，浓度范围为0-1mol/L进行洗脱，那么，问题是，如何确定纯水洗脱体积和Nacl溶液的洗脱体积？

不知道你是用什么方式纯化？是上凝胶柱么？
用柱子的话我先用缓冲液洗，一般洗至少一个半柱体积，再用含NaCl的缓冲液梯度洗脱，至少要让不同浓度的洗脱液都过了柱子才行，除非你知道大概的能够洗脱下来的盐浓度~

你这个问题问的呀，，，

关体积什么事呀？

纯水过渡到氯化钠，是氯化钠的浓度在变化的···

多糖的纯化要是过柱子那是要累死个人，而且纯化样品产率很低。建议用分级醇沉得方法进行纯化，这样快而且产率高，24小时就能搞定，要是过柱子最少要几个月。

你用的是纤维素柱吧，流速为四秒一滴，装柱后，先用蒸馏水平衡10h左右，上样，蒸馏水洗脱1000ml,再分别用0.05、0.1、0.3、0.5MNacl洗脱1000ml，确定最大组分，以后就可少量洗脱。

我做的金钱草多糖，用胃蛋白酶解，然后过凝胶柱，可不知道该怎么收集，PS：先出来的是氨基酸吧？后洗脱出来的是多糖？？怎么洗脱？怎么收集，求高人指点啊、

朋友你好，请教你个问题，DEAE纤维素柱一般分离多糖时的吸附载量大概多少啊，我要用到DEAE Sepharose fast flow分离多糖，不知道该用多少填料，1ml填料大概能吸附多少糖呢？

很讨厌过柱子，柱子效率低，为什么没有又快有好，而且产量大的手段，这样能做很多有意思的实验

柱层析是方程繁琐、效率低下、劳民伤财的苦差，你做之前需要有一定过得心理准备哦。呵呵
如何确定纯水洗脱体积和Nacl溶液的洗脱体积？
纯水洗脱是为了洗掉中性多糖，一般来说洗2个柱体积就可以了。（但但是严格来讲是应该在检测流出柱子的收集液不再含有多糖的时候，就可以换洗脱液了），至于Nacl溶液，按浓度有低到高，阶梯式洗脱，一般浓度不会超过2mol/L，洗脱体积还是和之前一样，洗2个柱体积就可以了。（但但是严格来讲是应该在检测流出柱子的收集液不再含有多糖的时候，就可以换洗脱液了）。当然你也可以选择使用线性洗脱，线性洗脱理论上讲，洗脱效果会更好

填料都有说明的  一般是30~40mg/ml的粗多糖的量吧 反正我当时是上样量是16mg/ml