食品分析者 » 讨论区 » 分析百问 » 多糖酶解 HPLC 去酶

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:[未解决]多糖酶解 HPLC 去酶

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
青青子衿[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 108003
精华 0
积分 978
帖子 1116
信誉分 100
可用分 1335
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-4-27
状态 离线
1

发表于 2013-5-5 22:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

多糖酶解 HPLC 去酶

急求！！！
我对提取的多糖进行了酶解，之后要用HPLC对水解后得到的寡糖进行分析。但是担心加入的酶试剂会影响HPLC的分析。一方面担心酶会不会堵柱子，还有一方面担心酶的峰会不会影响寡糖峰。
0.22的膜能过掉纤维素酶么？如果不能我该怎么出去这部分酶呢？它的存在会不会影响我的多糖酶解结果分析。
我考虑过sevage去蛋白，但是那样之后要进行透析，我担心透析的过程会把水解得到的寡糖去掉了。
有没有哪位前辈做过多糖酶解后HPLC分析的，可以给一些意见么？
顶部
兜兜[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 108005
精华 0
积分 949
帖子 1098
信誉分 100
可用分 1448
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-4-27
状态 离线
2

发表于 2013-5-5 22:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
会堵柱子，酶蛋白的分子量太大，色谱柱的孔径一般都300A以下。0.22um的滤膜过滤机械性杂质，纤维素酶水溶性的，溶解后能过滤膜。是不是可以考虑TLC。
顶部
mr.henry[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 108006
精华 0
积分 982
帖子 1124
信誉分 100
可用分 1339
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-4-27
状态 离线
3

发表于 2013-5-5 22:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
无论使用示差检测器还是紫外检测器，预处理正规操作，色谱条件合理，即使出峰，影响也不大。
顶部
小书虫[使用道具]
五级
Rank: 5Rank: 5


UID 106593
精华 0
积分 1604
帖子 1947
信誉分 100
可用分 2530
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-4-1
状态 离线
4

发表于 2013-5-6 15:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
分子量越小越易溶解于乙醇 越大越不溶  我也在做水解 可是我有些预备工作没做好 能请教你么？？？
顶部
outeer[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 108008
精华 0
积分 997
帖子 1173
信誉分 100
可用分 1566
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-4-27
状态 离线
5

发表于 2013-5-6 16:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
建议反应后，离心10000x RPM 10 分钟来沉淀 酶。低聚糖应该没事。 还有有些柱子用有机溶剂可能不好。 不知道你什么方法测糖，我觉得酶应该对糖没什么影响。
顶部
冰@舟[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 108009
精华 1
积分 985
帖子 1146
信誉分 102
可用分 1554
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-4-27
状态 离线
6

发表于 2013-5-6 16:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
用氯仿/异戊醇去蛋白？或者加热变性过膜去蛋白？
顶部