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标题:[未解决]黑木耳多糖的分级纯化

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黑木耳多糖的分级纯化

黑木耳多糖提取除蛋白脱色后上SePhadexG-200凝胶色谱柱纯化,但是多糖分不开。流动相是蒸馏水。有谁做过呢,请指教下下  谢谢了
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美丽婷婷[使用道具]
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呵呵 实验就是要试一试才知道行不行,建议你多看外文文献,国内的文献尽可能不要采纳。
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双_视野[使用道具]
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流动相用ph7.4的磷酸盐缓冲液试一试

有的文献报道说流动相用0.1mol/LNacl
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莫莫莫[使用道具]
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用nacl溶液试一下,流动相盐浓度、流速、多糖浓度需要试验
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千里之外[使用道具]
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用盐洗一洗看能不能洗脱下来,氯化钠,磷酸盐,醋酸盐都可以试一试,实在不行可以换吸附力更弱的superdex填料
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grace![使用道具]
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可以换一下其它的流动相
而且是不是填料没选到合适的,建议先做液相看一下分子量大概是多少,再来选择填料
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用离子交换先分一下,在用葡聚糖柱再分一下。
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hero_b[使用道具]
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SePhadexG-200凝胶色谱分离多糖原理是体积排阻,一般情况下使用水做流动相,可能由于你的多糖分子量分布范围较小,所以分的不是很好,如果分不开可以试试离子交换型凝胶,例如DEAE SePharose Fast Flow等,此时就可以用氯化钠做解吸溶剂,分离不同极性的多糖,再过凝胶柱进一步纯化。
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迷糊小鬼[使用道具]
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要先用离子柱进行分级分离,我们实验室主要做的就是多糖
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