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标题:【求助】菜鸟求助:AMPK抗体选择

079777chao[使用道具]
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【求助】菜鸟求助:AMPK抗体选择


本人要western检测AMPK,选择抗体时发现AMPK有各种亚基,不知道如何选择,请各位大侠指点迷津~不胜感激!
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QUOTE:
原帖由 079777chao 于 2013-5-7 18:15 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

本人要western检测AMPK,选择抗体时发现AMPK有各种亚基,不知道如何选择,请各位大侠指点迷津~不胜感激!

有总的AMPK抗体的
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不知道你要看的是总ampk 还是p-ampk?
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不知道你要看的是总ampk 还是p-ampk?

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顺道请教一下,我研究的是能量代谢信号通路,总的ampk和p-ampk在检测时,是否需要一起检测? ampk被磷酸化后是否才能表现出活性,激活其下游的靶目标基因表达呢?谢谢
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有PAN-AMPK抗体
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顺道请教一下,我研究的是能量代谢信号通路,总的ampk和p-ampk在检测时,是否需要一起检测? ampk被磷酸化后是否才能表现出活性,激活其下游的靶目标基因表达呢?谢谢

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一般来讲t-AMPK和p-AMPK都需要检测。而p-T172是最常用的检测位点,当然AMPK也可以不通过磷酸化或者通过激活其他位点而激活。一般较常用p-ACC作为检测AMPK激活的标志。
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一般来讲t-AMPK和p-AMPK都需要检测。而p-T172是最常用的检测位点,当然AMPK也可以不通过磷酸化或者通过激活其他位点而激活。一般较常用p-ACC作为检测AMPK激活的标志。

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再次请教一下,t-AMPK是什么啊?我购买的就有AMPK和P-AMPK一抗,而没有t-AMPK。另外不知道一种物质是否通过磷酸化还是其它位点而激活AMPK,那么应如何检测呢?期待你的解答。
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t-AMPK就是total-AMPK,即总AMPK。如果你要检测的是AMPK是否被激活的话用p-ACC就可以了。如果你要看“一种物质”是怎样激活AMPK的话可以把可能的位点都试一遍,不过这样做估计不太靠谱。
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079777chao[使用道具]
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不知道你要看的是总ampk 还是p-ampk?

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在CST问的,只有α亚基的,我是想看AMPK是否被激活,是不是只要看P-AMPK就行了?谢谢~
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fei1226com[使用道具]
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我在CST问的,只有α亚基的,我是想看AMPK是否被激活,是不是只要看P-AMPK就行了?谢谢~

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同上,看AMPK是否被激活看p-ACC就可以了,p-T172只能看是否是在该位点磷酸化。
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