【求助】蛋白分子量8.5KD，求分离胶和浓缩胶的浓度...

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标题:【求助】蛋白分子量8.5KD，求分离胶和浓缩胶的浓度...

sr9971[使用道具]
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发表于 2013-5-10 13:41 资料个人空间短消息加为好友

小中大

各位高手，最近做western，蛋白分子量8.5KD，分离胶和浓缩胶的浓度分别是多少？谢谢！！！！

fei1226com[使用道具]
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发表于 2013-5-10 13:42 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 sr9971 于 2013-5-10 13:41 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

各位高手，最近做western，蛋白分子量8.5KD，分离胶和浓缩胶的浓度分别是多少？谢谢！！！！

http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/article/downloadArticleFile.do?attachType=PDF&id=13807

rxcc33[使用道具]
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发表于 2013-5-10 13:42 资料个人空间短消息加为好友

小中大

浓缩胶5%
分离胶用8%最好，也可以用10%

greenbee[使用道具]
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发表于 2013-5-10 13:42 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 rxcc33 于 2013-5-10 13:42 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

浓缩胶5%
分离胶用8%最好，也可以用10%

8.5kDa的蛋白质，分离胶不应该用15%的么？

rxcc33[使用道具]
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发表于 2013-5-10 13:43 资料个人空间短消息加为好友

小中大

看错了，没注意到还有个小数点，SORRY
应该是15%的胶

qiangren789[使用道具]
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发表于 2013-5-10 13:43 资料个人空间短消息加为好友

小中大

楼主请学习freecell管理给的文献
8.5KD, 常规的15%SDS-PAGE，哪能跑出结果来？要用Tricine。

多看资料多看书，别偷懒什么都在这里问。
回答问题请看仔细，负责任点。

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发表于 2013-5-10 13:44 资料个人空间短消息加为好友

小中大

8.5KD, 常规的15%SDS-PAGE，的确有可能跑不出来，最好要用Tricine
不过我在实验中发现，常规电泳如果不要跑太长时间也是可以的，我不敢保证每一个人都能成功
楼主可以试一试，最好用预染marker做指示，千万不要让溴酚蓝跑到最下面才停止电泳，这样条带很可能就扩散了
一般跑到1半左右可能就差不多了

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发表于 2013-5-10 13:44 资料个人空间短消息加为好友

小中大

Tricine是最好的选择

gogo[使用道具]
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发表于 2013-5-10 13:44 资料个人空间短消息加为好友

小中大

可以用18%的胶，我用的还可以，至少7KD是能跑出来的。祝好运！