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标题:【求助】薄层色谱检验多糖

89tongzijun[使用道具]
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发表于 2013-5-10 13:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】薄层色谱检验多糖


各位老师，我想用薄层色谱粗略的看一下多糖的纯度，该选用什么展开剂呢？
我看到有人说用正丁醇：浓氨水：水，可否行得通？在紫外灯下是否可以看到显色？
谢谢！
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gogo[使用道具]
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发表于 2013-5-10 13:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我这几天一直在做水解多糖后的薄层层析。我不是太懂你是怎么检测多糖的纯度的。我就是想问你：你选择什么做对照？
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89tongzijun[使用道具]
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发表于 2013-5-10 13:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我想用标准品做对照
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 小中大

你有多糖的标准品吗？一般都是水解后用单糖做TLC的。
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89tongzijun[使用道具]
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发表于 2013-5-10 13:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
水解之后一般是检验单糖组成吧,我就想看看我纯化的多糖的纯度
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qqq111[使用道具]
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 小中大
多糖的纸色谱我试过，领导说一般的滤纸就可以，但是我用做分析用的定量滤纸结果不行，斑点很模糊，其实有专门的层析滤纸（比如新华滤纸厂就有），你可以他们买。试试看。
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qqq111[使用道具]
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发表于 2013-5-10 13:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

多糖的硅胶薄层色谱和微晶纤维素薄层色谱我也做过，纸色谱和薄层色谱看多糖纯度都是比较粗略的，如果你的样品有分子量不同的多糖，也很难分开，如果是单糖和寡糖那还有点希望。目前看多糖纯度最可靠的方法是高效凝胶渗透色谱法，当然需要的设备要昂贵的多。两附件来自张惟杰的复合多糖生化研究技术，比较权威，你参考一下，挺详细的。
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gogo[使用道具]
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发表于 2013-5-10 13:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我还是想问你:你是用什么做对照来使用TLC检测多糖的纯度的?
我现在在做硅胶薄层层析可是样品一直不出斑点，大家能帮我分析一下是什么原因吗？我的样品是加CF3COOH在100度烘箱中水解8h，真空干燥，再重复水解1次，真空干燥。然后用50%乙腈溶解，点样的。大家帮我看看有什么问题。谢谢了。
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pengke1983[使用道具]
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发表于 2013-5-10 13:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
均一多糖不是单体，没有统一的结构式，检测其纯度没有别的对照品可用，只能用其自身做对照，当然你要首先证明其是均一多糖。

楼主的试验目的好像不是为了检测多糖纯度，而是想看看多糖是否三氟乙酸水解完全了。如果这样的话，你可以用你水解前的样品做对照。你的薄层上没有斑点，是否因为薄层色谱条件选择不当样品在原点没动，或者50％乙腈对糖的溶解性太差，不能换用少量蒸馏水溶解吗？

顺便问一句，你水解时冲氮封管了吗？
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89tongzijun[使用道具]
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发表于 2013-5-10 13:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我有多糖对照品，但是只有一点点，自己还得提纯一些，所以只想将自己提纯的和标准品做个对照，粗步检测其纯度。
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