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你可以买现成的（如果经费比较充足），推荐用SIGMA的COCKTAIL，效果挺不错的。
其实完全可以自己配：氟化钠50mM（ser/thr磷酸酶抑制剂），钒酸钠0.2mM（tyr磷酸酶抑制剂），注意钒酸钠现用现加。
不过不加磷酸化抑制剂也可以，但是有可能会影响试验结果。我自己大部分时候是不加的，也能得到结果的。
做磷酸化蛋白的WB,还有几点要注意：
1.蛋白的磷酸化是一个非常迅速的反应，所以取样品的过程要迅速，样品要新鲜。
2.提取蛋白后要尽快做，越快越好，否则一些因素导致目的条带很难出来。另外尽量冰上操作，操作时间尽量短。
3. 封闭液最好用BSA，因为奶粉含有酪蛋白（一种磷蛋白），如果脱脂用奶粉，有可能出现背景深的现象。建议先用脱脂奶粉，如果背景脏，就改为BSA。
