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标题:【求助】做western跑电泳，总是漏样品

sunshine039[使用道具]
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发表于 2013-5-11 16:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】做western跑电泳，总是漏样品


做western跑电泳，到八分钟左右时，也就是样品刚从孔进入胶的时候，总是漏样品。把胶拿出来看后，明显感到浓缩胶比分离胶要薄，到底是什么原因啊？求大神帮忙！！！
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kuaizige[使用道具]
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发表于 2013-5-11 16:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请问以前出现过这种状况吗？是不是浓缩胶凝胶时间太短啊？
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xueyouzhang[使用道具]
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发表于 2013-5-11 16:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

情况一：你在加浓缩胶之前可能没有将分离胶上的液体洗干净，这样会出现漏样的情况

情况二：就是你说的那种胶没有凝好
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sunshine039[使用道具]
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发表于 2013-5-11 16:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 xueyouzhang 于 2013-5-11 16:51 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

情况一：你在加浓缩胶之前可能没有将分离胶上的液体洗干净，这样会出现漏样的情况

情况二：就是你说的那种胶没有凝好


是没凝好？我们之前都觉得是放时间长，胶缩掉了。我们一般在空调房里放三十到四十分钟，在外面室温放一个小时。我们分离胶上是用的异丙醇，直接挥发掉再加浓缩胶的啊！
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dog002[使用道具]
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发表于 2013-5-11 16:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

分离胶液封用三蒸水，室温下，不到10min就凝固了。然后倒出三蒸水。用纸在边上吸一下。
浓缩胶灌入，加入梳子后。大约也不到10min就凝固了吧。然后正常电泳。不懂的，参照我们实验室的SOP。
cuturl('http://d.dxy.cn/detail/4630874')
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发表于 2013-5-11 16:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你配药的水有问题，检测一下你配的溶度，和使用水的要求，还有就是你配完之后没有混匀，凝胶时间短，APS和EMDA，30％SDS有问题。
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wood533[使用道具]
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发表于 2013-5-11 16:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

一般没有出现这个问题，我们用的也是三蒸水，时间差不多和上面那位哥的。一定要把握好时间。
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lxh031[使用道具]
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发表于 2013-5-11 16:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
是没凝好？我们之前都觉得是放时间长，胶缩掉了。我们一般在空调房里放三十到四十分钟，在外面室温放一个小时。我们分离胶上是用的异丙醇，直接挥发掉再加浓缩胶的啊！

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异丙醇要用水冲干净啊
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kuohao17[使用道具]
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发表于 2013-5-11 16:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
分离胶液封用三蒸水，室温下，不到10min就凝固了。然后倒出三蒸水。用纸在边上吸一下。
浓缩胶灌入，加入梳子后。大约也不到10min就凝固了吧。然后正常电泳。不懂的，参照我们实验室的SOP。
cuturl('http://d.dxy.cn/detail/4630874')

===================================

分离胶液面不平整什么原因？
打分离胶时有点气泡，抖抖架子会导致不平吗？
我是用异丙醇封胶。
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sunshine039[使用道具]
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发表于 2013-5-11 16:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你配药的水有问题，检测一下你配的溶度，和使用水的要求，还有就是你配完之后没有混匀，凝胶时间短，APS和EMDA，30％SDS有问题。

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嗯，有可能呢，现在实验室用的都是买的纯净水
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