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我个人认为：
1.电转液里不应该有SDS或者其他表面活性剂，会影响转膜效率。我用的转膜液配方是3.03g的Tris，14.4g的Glycine，甲醇200ml，双蒸水定容到1000ml，无需调整，4度存放，使用前预冷，建议放-20度超过2个小时再使用。请勿反复使用，最多使用三次就差不多了。
2.120kDa的蛋白100v电压2h就足够了。
3.请确认是否转膜方向错误。因为marker应该不超过30min就转过去了。所以请用立春红染一下膜，看看膜上还有没有其他蛋白，来确认转膜方向是否正确。
4.请在转膜完毕后用考马斯亮蓝染一下胶，看看跑胶有没有问题，转膜效率非100%，如果跑胶无问题，应该染出很清晰的条带。一定在转膜之后染，染了考马斯亮蓝之后就无法转膜了。
别人成功你失败，一定要从多方面仔细找原因，避免再次失败，祝你成功。
