蛋白质与蛋白组学

自己顶下。介绍我们现在做实验简况如下:模型:SD大鼠缺血再灌注模型。取材:缺血处大脑皮层。观察指标:神经元凋亡情况与erk1/2,jnk1/2，p38表达，的水平的相关性。目前疑惑:wb方面，我们检测该通路的这三个蛋白，包括总蛋白水平和磷酸化水平，但这三个蛋白均有数个磷酸化位点，我查阅了相关文献，见较多研究都是使用可同时识别两个磷酸化抗体，如:JNK1/2(Thr183/Tyr185) ，P38 (Thr180/Tyr182) ，Erk1/2(Thr202/Tyr204) ，个人认为像这样可以识别两个位点的抗体做出带来也不能说明该两个位点均被磷酸吧，基于只要一个位点磷酸化也杂出带的原因，那么使用双位点抗体的原因或优势在哪里呢，另外如果我只用一个位点的磷酸化抗体的话，得出来的结果是否可以说明该蛋白磷酸化水平与凋亡的相关性呢，谢谢了。

=========================================================================================================

双位点磷酸化抗体是只识别当两个位点都磷酸化状态时的蛋白，其中任何一个蛋白的磷酸化都不会被双位点磷酸化的抗体识别，希望可以帮到你。

双位点磷酸化抗体是只识别当两个位点都磷酸化状态时的蛋白，其中任何一个蛋白的磷酸化都不会被双位点磷酸化的抗体识别，希望可以帮到你。】

=====================================

一语化解疑惑，小弟免疫方面基础太差，十分感激。

顶一下，接楼主的问题，加提一个问题：双位点抗体的特异性是不是比单位点抗体差呢？单位点抗体与双位点抗体各有什么优势呢？

===================================================================================

1）双位点磷酸化抗体特异性更高
2）单位点只识别单个位点磷酸化蛋白状态。
3）双位点识别两个位点同时磷酸化时状态，比如P38的180/182同时被磷酸化之后才会被????双位点磷酸化识别。