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标题:【求助】蛋白晶体做X射线衍射为什么总是没有衍射点

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发表于 2013-5-16 18:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】蛋白晶体做X射线衍射为什么总是没有衍射点


最近做一个蛋白酶的结晶，几个条件长了晶体，可是做X射线衍射是总是没有衍射点，有什么因素会造成这种情况呢?请大家帮忙，谢谢~~
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abc816[使用道具]
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发表于 2013-5-16 18:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

晶形是什么样的？X射线源是什么？检测设备？
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发表于 2013-5-16 18:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

首先确定不是盐晶，盐晶只有低分辨率的点，蛋白晶体不衍射也比较正常，由于晶体本身的质量不高导致，尝试下不同的生长条件和温度，还可以尝试把flexible的region去掉
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发表于 2013-5-16 18:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 abc816 于 2013-5-16 18:06 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

晶形是什么样的？X射线源是什么？检测设备？

之前的晶形是挺规则的长方形，最近长得不太规则，没有固定形状，但是都没有点。X射线源和设备名称我还真不太清楚，大家都用的，X射线源和检测设备会有很大不同吗？
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发表于 2013-5-16 18:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 windy+++ 于 2013-5-16 18:06 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

首先确定不是盐晶，盐晶只有低分辨率的点，蛋白晶体不衍射也比较正常，由于晶体本身的质量不高导致，尝试下不同的生长条件和温度，还可以尝试把flexible的region去掉 ...


试了挺多条件，在室温下生长了近一个月，不算快了吧？谢谢~~标签是不是也会有影响？我这个是切了GST标签的，如果不切或者加His标签会有改善吗？~~
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发表于 2013-5-16 18:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
之前的晶形是挺规则的长方形，最近长得不太规则，没有固定形状，但是都没有点。X射线源和设备名称我还真不太清楚，大家都用的，X射线源和检测设备会有很大不同吗？
知道的话方便提出一些具体建议，不过盐晶一般是出很强的衍射点，所以你得到的应该是蛋白晶体没错。

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如果晶体生长不规则的话可能还要优化条件，此外Hampton的那个Additive Screen里面有很多值得尝试的辅助成分，如果能得到一种不同晶形的晶体也许衍射会有改善。
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发表于 2013-5-16 18:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
知道的话方便提出一些具体建议，不过盐晶一般是出很强的衍射点，所以你得到的应该是蛋白晶体没错。

===========================================================================================================

如果晶体生长不规则的话可能还要优化条件，此外Hampton的那个Additive Screen里面有很多值得尝试的辅助成分，如果能得到一种不同晶形的晶体也许衍射会有改善。
目前估计我只有先优化条件了~~谢谢啦~~我在实验室找到了additive screen的kit，我去试试好了~~
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发表于 2013-5-16 18:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

好像没有看到楼主确定是不是盐晶。
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发表于 2013-5-16 18:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
好像没有看到楼主确定是不是盐晶。

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盐晶是不是应该有些点？我这个真是一点儿点都没有~~
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发表于 2013-5-16 18:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

敢问楼主问题解决了吗？我遇到了与你同样的问题。。。不过你可以试试蛋白结晶脱水，再试衍射
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