【求助】WB图像为什么呈牙齿状？

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标题:【求助】WB图像为什么呈牙齿状？

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发表于 2013-5-18 13:06 资料个人空间短消息加为好友

小中大

各位前辈，帮我看看为什么我最近做的NF-KB老是出现牙齿状的图像？先谢谢了

附件

2013-5-18 13:06

29494424.jpg (4.33 KB)

2013-5-18 13:06

42666681.jpg (5.41 KB)

qumm1985[使用道具]
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发表于 2013-5-18 13:07 资料个人空间短消息加为好友

小中大

可能是电泳出了问题建议楼主按照大家推荐的配方和条件再跑跑胶

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发表于 2013-5-18 13:07 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 qumm1985 于 2013-5-18 13:07 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

可能是电泳出了问题建议楼主按照大家推荐的配方和条件再跑跑胶

多谢，可是内参都跑的挺好的，这是为什么呢？

caihong[使用道具]
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发表于 2013-5-18 13:08 资料个人空间短消息加为好友

小中大

会不会是配胶不均匀或者电泳时电压或电流太大导致锯齿状还有会不会电泳或转膜产热过高蛋白分解变得弥散了？

windy+++[使用道具]
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发表于 2013-5-18 13:08 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我最近也有类似的情况出现，两周了做了12次也没找到原因呢，一一排除，最终锁定是在配胶跑电泳的过程中产生的问题。但是依旧没找到原因。

6327555[使用道具]
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发表于 2013-5-18 13:10 资料个人空间短消息加为好友

小中大

会不会是配胶不均匀或者电泳时电压或电流太大导致锯齿状还有会不会电泳或转膜产热过高蛋白分解变得弥散了？

===================================================

如果那样内参不受影响吗?最近做的两次还是那样，但是内参也是好的

什么原因呢？哎呀，郁闷死了

附件

2013-5-18 13:10

47269806.jpg (2.9 KB)

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发表于 2013-5-18 13:10 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我最近也有类似的情况出现，两周了做了12次也没找到原因呢，一一排除，最终锁定是在配胶跑电泳的过程中产生的问题。但是依旧没找到原因。

=========================================

你这个问题解决了吗？我昨天跑的还是那样，郁闷死了

caihong[使用道具]
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发表于 2013-5-18 13:11 资料个人空间短消息加为好友

小中大

你这个问题解决了吗？我昨天跑的还是那样，郁闷死了

==========================================================================================================

我的内参每次都非常好看，非常整齐。但是target就是unclear，当然主要是小分子的target会这样，大分子的就还好。始终没找到原因。我通过染胶比对，发现胶上的band就是unclear的和最后显色结果一致。这说明问题出在transfer之前。于是只有电泳和制胶两部分，这还分人为因素和物质因素。于是我借用了别人的制胶物质，跑出来的target正常的，所以我认为我的物质出了问题，而不是我配制的有问题，何况我都做了好久了，结果一直没出过这种问题。但是我用每次调整一个变量的方式测试了除trisHCL6.8和8.8的所有物质，都没有异常。说明不是那些东西有问题，又测了trisHCL的PH 误差在0.1，所以我非常迷惑问题到底在哪儿？

tudou85[使用道具]
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发表于 2013-5-18 13:11 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 caihong 于 2013-5-18 13:11 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
你这个问题解决了吗？我昨天跑的还是那样，郁闷死了

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我的内参每次都非常好看，非常整齐。但是target就是 ...

重新配一下trisHCL6.8和8.8试试我做实验时也出现过这种情况当时也是总找不到原因后来买的碧云天瓶装的trisHCL6.8和8.8 重新配的AP 另外建议那位楼主转膜时多放点冰块总觉得目的蛋白好像被分解似的条带很弥散

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发表于 2013-5-18 13:12 资料个人空间短消息加为好友

小中大

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原帖由 tudou85 于 2013-5-18 13:11 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

重新配一下trisHCL6.8和8.8试试我做实验时也出现过这种情况当时也是总找不到原因后来买的碧云天瓶装的trisHCL6.8和8.8 重新配的AP 另外建议那位楼主转膜时多放点冰块总觉得目的蛋白好像被分解似的条带很弥散 ...

嗯，好的，明天借别人配胶的试剂重新再做一次，上图给大家看看效果

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