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标题:【求助】PH8.8的 tris的 配方

30moonriver[使用道具]
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【求助】PH8.8的 tris的 配方


各位战友,我的PH8.8的 tris的 配方是80ml水加18.165gtris碱,调PH值至8.8,可配胶时总是不凝,换别的实验室的PH8.8的tris它就凝了。请问是我的配方问题吗?我都已经重新配置过好几次了,PH值应该是准确的,还有配完后要高压吗?
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gemei0115[使用道具]
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按TAKALA目录册后面的附录配方就可以了。PH 和胶凝没有关系的。凝胶和APS及TEMED有关。
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applebook=213[使用道具]
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应该是80ml水加18.165gtris碱,调PH值至8.8后,定容至100ml.
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30moonriver[使用道具]
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请问配好的PH8.8的 tris要高压吗?
不高压与胶凝有没有关系啊?
谢谢!!!
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yjf1026[使用道具]
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按TAKALA目录册后面的附录配方就可以了。PH 和胶凝没有关系的。凝胶和APS及TEMED有关。

===========================================================================================================

PH是用来形成浓度梯度用,和胶凝不凝没有关系的。10%APS才是用来凝胶的,TEMED用来加速APS的凝结速度。或者,可能你的Tris试剂本身有问题。买个新的用用看吧。

Tris本身的配方 就是 Tris和HCl,然后再调PH。
1.5M Tris/HCl buffer, PH 8.8
0.5M Tris/HCl buffer, PH 6.8
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89tongzijun[使用道具]
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配置完以后高压灭菌!
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mickeylin[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 89tongzijun 于 2013-5-23 11:07 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

配置完以后高压灭菌!

不是吧,配置完后不需要高压灭菌的。
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我今天刚刚高压灭菌了一下,以前都是不灭的,室温放着,前几天赫然发现长霉菌了
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bamboo16[使用道具]
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其实不灭菌是可以的,但是建议过滤,因为电泳级别的东西杂质对结果的影响还是挺大的,所以还是过滤一下比较好。Tris缓冲里面确实可能长菌,我们实验室TBST放在室温也是经常长细菌的,但是一旦放进4度冰箱就会维持较长的一段时间不长细菌,我们一般拿来配抗体和封闭液用,室温的就用来洗膜。就算灭菌了,操作环境并不是无菌环境,所以如果怕长细菌就放在4度冰箱,只不过抑制细菌过快生长罢了。
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yueban-1147[使用道具]
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胶不凝通常是由10%APS引起的. 主要是由APS的质量和效价决定的.
进口的APS,如Bio-Rad的APS的效价是国产APS的10倍.
所以,胶不凝90%以上是这个造成的。
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