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标题:[未解决]请教:测定脂类含量系统相关问题!!

  [未解决]本主题悬赏 可用分 1  
花火[使用道具]
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请教:测定脂类含量系统相关问题!!

建一个HPLC+MS测定脂类含量的系统要多久?

现在对生物体脂类(具体来说是鞘脂类)定量很感兴趣,而且现在实验室掌握的突变体以及idea下,如果能有方法定量脂类将对研究很有帮助。

具体的情况是:
1、提取和测定的方法已经有文献报道(相同的测定对象且相同的物种),虽然数量不多。
2、测定需要的标样可以买到(文章上写的标样全部来自商业公司,且此公司的产品在国内有代理)。但商业公司标样没有具体标明动植物,我做的是植物。
3、学院里有一个实验室有一台三重四级杆质谱仪,且此实验室方向为药物分析,貌似用的很多。但对脂类定量应该没有经验

我应该把时间花在什么地方呢?

谢谢大家!
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fence-straddler[使用道具]
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回复 #1 花火 的帖子

鞘脂类不管是动物源还是植物源都有很多种,首先你得确定标品买的却是你们要研究的哪些脂。

有了标品就可以试验文献的方法了。或者进一步调整。

没有标准品无法衡量方法的准确性,无法准确定量,但可以先通过自己的样品熟悉仪器操作及参数优化。手头有什么就先干什么吧。
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wtz010[使用道具]
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个人认为楼主在建立质谱方法时可能难度有点大,主要原因是脂类测定时,内源性物质干扰比较大,如果把这个问题解决了,那整个测定还是可以的。
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花火[使用道具]
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脂类的提取方法文献上有很详细的说明。这两天看了论坛里的一些帖子。如果要定量一种物质是不是要先建立MRM方法学啊?

根据文献报道他们可以从植物里分离出138种不同的鞘脂,并在后面附了一张表其中包括每种鞘脂的结构(多少取代基、双键位置数量等等)然后在后面有这样一些参数:【M+H】(m/z) product ion(m/z) dwell time(ms) DP(V) DE(V) ET(min)

这是不是意味着我就不用再建立方法学了?只需要拿提好的样品和标样混合然后做LC/MS 把得到的结果跟表里的数据做比对就可以了?
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wtz010[使用道具]
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如果你要用于定量,就需要建立质谱方法。当然,质谱方法包括MRM,还有SIR等。

虽然文献有报道,但是到了你的仪器上,那些参数却不一定合适。所以还需要在你使用的仪器上重新 建立方法。。
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