小中大相对楼上建议要做的是
1,测量菌体的湿重,以更好的了解菌体生长规律。
2,开始时最好每24小时取样一次,从24小时开始,直到144小时,如果是胞内表达,离心后要及时制备样品,不能及时做-70度冰箱保存,对于分泌型表达,上清夜要放于-70度冰箱保存,最好进行浓缩。跑SDS-PAGE胶时如果培养基中加有磷酸缓冲液,最好进行脱盐处理。
3,毕赤酵母表达蛋白因为本身有蛋白酶,所以容易出现降解现象,最好有相应的抗体进行检测。
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磷酸缓冲液会影响PAGE电泳么?我曾经直接跑过,感觉条带还行,但我并不确定PBS是否对电泳有没有影响,希望有战友能帮忙解答一下。