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标题:【求助】究竟bsa或牛奶封闭是否影响结果?

=菓子=[使用道具]
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【求助】究竟bsa或牛奶封闭是否影响结果?


我做的是ps1,28kd左右,刚开始几次用牛奶封闭(光明脱脂奶)做不出来,后来该用1%bsa封闭居然做出来(虽然同时加大了上样量),只是非特异带太多,看群友都说两者封闭效果差不多,于是在接下来的几次里再次改用牛奶封闭(bsa太贵,而且杂带确实很多),而且上样量>=上次做出来的上样量,但都没有做出来,直接一片空白,
我真的想知道bsa或牛奶封闭在能不能做出来这方面起到这么大的决定作用?
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zsxan1990[使用道具]
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回复 #1 =菓子= 的帖子

这个区别是有可能的,不过只是极个别现象。

用牛奶封闭要注意牛奶容易变质,变质后肯定就是白板了。
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=菓子=[使用道具]
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每次牛奶封闭我都是新配的,应该没有问题。不知你或者其他战友有没有碰见过这样的情况?
谢谢
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moonlight45[使用道具]
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不同的目的蛋白用不同的封闭液,貌似bsa封闭效果会好点,因为贵所以大家尽量选择牛奶,我用脱脂奶粉封闭没有条带,用Bsa就好了很多,你可以尝试再封闭久点。
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=菓子=[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 moonlight45 于 2013-5-24 16:15 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

不同的目的蛋白用不同的封闭液,貌似bsa封闭效果会好点,因为贵所以大家尽量选择牛奶,我用脱脂奶粉封闭没有条带,用Bsa就好了很多,你可以尝试再封闭久点。 ...

我已经封闭了两个小时,请问用BSA应该封闭多长时间呢?谢谢
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damingxia0904[使用道具]
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我已经封闭了两个小时,请问用BSA应该封闭多长时间呢?谢谢

===================

我一般都4度封闭过夜
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moonlight45[使用道具]
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我用3%BSA,也室温封闭两小时。
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=菓子=[使用道具]
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我一般将二抗加牛奶里面封闭过夜
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我的与你相反,我原来用牛奶封闭,用牛奶加一抗4°过夜,牛奶加二抗2小时,然后发光能做出条带,就是压的时间长点;但是后来用BSA替换牛奶,就是一团黑,我也在纳闷呢,请教下!!!
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langlang[使用道具]
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我做的是ps1,28kd左右,刚开始几次用牛奶封闭(光明脱脂奶)做不出来,后来该用1%bsa封闭居然做出来(虽然同时加大了上样量),只是非特异带太多,看园子里战友都说两者封闭效果差不多,于是在接下来的几次里再次改用牛奶封闭(bsa太贵,而且杂带确实很多),而且上样量>=上次做出来的上样量,但都没有做出来,直接一片空白,
我真的想知道bsa或牛奶封闭在能不能做出来这方面起到这么大的决定作用?

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用BSA和牛奶封闭都差不多,只不过前者价钱贵了点,因为比较纯,这个问题也是根据不同蛋白的说明而定,比如有的磷酸化蛋白就需要用含BSA的TBST来稀释一抗。
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