小中大我做的是ps1,28kd左右,刚开始几次用牛奶封闭(光明脱脂奶)做不出来,后来该用1%bsa封闭居然做出来(虽然同时加大了上样量),只是非特异带太多,看园子里战友都说两者封闭效果差不多,于是在接下来的几次里再次改用牛奶封闭(bsa太贵,而且杂带确实很多),而且上样量>=上次做出来的上样量,但都没有做出来,直接一片空白,
我真的想知道bsa或牛奶封闭在能不能做出来这方面起到这么大的决定作用?
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用BSA和牛奶封闭都差不多,只不过前者价钱贵了点,因为比较纯,这个问题也是根据不同蛋白的说明而定,比如有的磷酸化蛋白就需要用含BSA的TBST来稀释一抗。