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标题:【求助】western blot可以同时加几种一抗吗？

雪原[使用道具]
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发表于 2013-5-25 12:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】western blot可以同时加几种一抗吗？


请教各位战友，western blot可以同时加几种一抗吗？

如果把检测的几种目的蛋白一张PVDF膜一次搞定好像很方便啊
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lixi559[使用道具]
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发表于 2013-5-25 12:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

两种是可以的！！而且这样发出来的更具有说服力！！我见过的。再多了就不知道了。
当然，不能有交叉反应。二抗最好相同，不同也可以
如果几个条带距离较远，保守起见，还是切开好些！有些时候太想省事结果可能出现其他意外，保守起见
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雪原[使用道具]
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发表于 2013-5-25 13:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

理论上应该可以
可就是没见过周围的人这么做过
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junjie05[使用道具]
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发表于 2013-5-25 13:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

可以的条件有几个，
1。你要做抗体的Validation，确定抗体的条带唯一，或者确定不会干扰另外一个蛋白的条带。
2。用不同种属的抗体，同时用不同的荧光抗体，用荧光检测仪检测（比如ODYSEE）。
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applebook=213[使用道具]
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发表于 2013-5-25 13:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
还不如剪开了做呢。
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mamamiya[使用道具]
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发表于 2013-5-25 13:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
目的蛋白距离 可以分开

一抗 全部用同一种属来源的单抗
二抗 一种 抗（选抗一抗种属igG抗体，进口的那种）

可以
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finger[使用道具]
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发表于 2013-5-25 13:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

可以的，我们周围就有加内参和目的的一抗一起做的
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okhaha[使用道具]
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发表于 2013-5-25 13:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

单抗可以一起加，没有交叉反应的话，多抗呢，没做出来像样的结果，模糊
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ha111[使用道具]
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发表于 2013-5-25 13:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
还是剪开做吧，混在一起，从科学的角度说，即使做出来了，你也不能说上边的条带是这个蛋白的，下边的条带是另外一个蛋白的！
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2541[使用道具]
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发表于 2013-5-25 13:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

理论上可以，但实际上，还是剪开吧。

本来想省事，但出了问题，重做的话，结果很可能更费事。
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