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标题:【求助】蛋白电泳跑到一半但不不再往下跑了

小游abc[使用道具]
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发表于 2013-5-30 16:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】蛋白电泳跑到一半但不不再往下跑了


各位战友，我最近在跑蛋白电泳时，总是在跑到一半时，所有小蛋白包括小分子量marker，都积聚在一条线上，非常细（如图），继续跑这一条线平行的下移，不再分开。让人觉得所有的蛋白跑到这条线上就被截住了。请问是什么问题啊？我把试剂全换了，但还是有种问题，是电泳槽的问题吗？谢谢！


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发表于 2013-5-30 16:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

正常情况，分离胶浓度的限制。

建议看看电泳的基本原理。
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发表于 2013-5-30 16:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 eric930 于 2013-5-30 16:09 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

正常情况，分离胶浓度的限制。

建议看看电泳的基本原理。

谢谢您的指导，可是以前也跑的不是这样的，分离胶浓度是怎么限制的啊？不好意思，我想不出什么原因！而且marker在跑到过程中还会多出一条带就是那条细带，当这条细带赶上marker时，他们就合二为一了，越来越细，跑完就成图上那样了！
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发表于 2013-5-30 16:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

marker是16kD的
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发表于 2013-5-30 16:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
marker最小是16kD的，您是不是说小蛋白分不开所以全集中在最前面啊！可是我这两天换了蛋白marker，最小的是10kD的跑电泳，发现10kD可以跑下来，但是在17kD那还是有那条线，而且marker的间距与说明书不同


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 小中大

谢谢您的指点，这张标出10kD的位置了！


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发表于 2013-5-30 16:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

多少浓度的分离教？
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发表于 2013-5-30 16:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 DDD 于 2013-5-30 16:12 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

多少浓度的分离教？

12%的分离胶
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 小中大

如果你想跑10k的蛋白，你可以试试看15%的胶怎么样

invitrogen的4-12%的bis-tris预制胶用MES buffer跑，可以很清楚的分离10k以下的蛋白，你也可以试试看用他们的配方来自己配胶和电泳buffer
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发表于 2013-5-30 16:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

最近我们跑胶也遇到过一次同样的问题，那次跑胶的时间比较平时长，分离胶10%，后来把电泳时间缩短了，换了12%的胶，结果正常了，很奇快的现象，至今没想明白。
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