小中大谢谢大家！可惜我的Tris—HCl(pH6.8) 是0.5mol/L的，且手头只有DTT，没有beta巯基乙醇，原先我用的配方是：还原型5XSDS上样缓冲液 0.5 mol/L Tris·HCl（pH6.8） 2.5ml
二硫叔糖醇（DTT，MW154.5） 0.39g
SDS 0.5g
溴酚蓝 0.025
甘油 2.5ml------想知道是否可以用蒸馏水稀释成2xSDS凝胶加样缓冲液？
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Loading Buffer的最终使用浓度是：
2% SDS
60 mmol/L Tris-Cl（pH 6.8）
10% 甘油
0.01% 溴酚兰
100 mmol/L DTT（贮存液-20度保存，临用前加入）
所谓2X，5X或者6X的Loading Buffer，其实就是上述成分的浓缩液。楼主可以对比一下kuang贴的2X配方，刚好就是所有成分的浓度乘以2。有些配方的Tris终浓度是50 mmol/L，有些配方的溴酚兰可能加得比较多，有些6X配方甘油没有60%这么多，这些都无所谓，不影响实验结果。只要保证SDS终浓度是2%，DTT终浓度是100 mmol/L，Tris的pH值是6.8就可以了。
另外，DTT和巯基乙醇的作用是一样的，二者加其一即可。DTT比巯基乙醇贵，效果也比巯基乙醇好。
至于楼主的配方可不可以稀释，相信看了上面的自己都知道了吧？
